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SiRNA沉默SATB1基因对前列腺癌DU145细胞的生物学影响
前言
前列腺癌是男性常见的恶性肿瘤之一，其发病率随着人口老龄化逐年增高。SATB1是一种特异性DNA结合蛋白，与肿瘤发生发展密切相关。因此，本文利用siRNA技术，研究SATB1基因在前列腺癌DU145细胞中的生物学影响，为探索新的治疗策略提供参考。
方法
1.细胞培养及siRNA转染
DU145细胞株购自美国ATCC（AmericanTypeCultureCollection），采用DMEM培养基（Biosharp，中国）和10%FBS（Gibco，美国）进行培养。使用Lipofectamine™2000（Invitrogen，加拿大）将SATB1siRNA按照说明书转染至DU145细胞系中，并设置对照组。
2.Real-timePCR分析
取细胞总RNA，逆转录成cDNA，使用SYBRGreen探针（Takara，日本）进行Real-timePCR分析。相对表达量采用2^-ΔΔCt法计算。
3.Westernblotting
取细胞总蛋白，进行SDS-PAGE分离，使用特异性抗体进行免疫印迹分析。
4.细胞增殖与凋亡检测
通过MTT法检测靶向基因沉默对细胞增殖的影响，并通过流式细胞术检测细胞凋亡率的变化。
结果
1.SATB1siRNA沉默后实时PCR分析结果显示，相对表达量下降至70%。
2.Westernblotting结果显示，SATB1蛋白表达下降约60%。
3.MTT法实验结果显示，SATB1沉默能够显著抑制DU145细胞增殖。
4.流式细胞术结果显示，与对照组相比，SATB1siRNA转染组细胞凋亡明显上升。
讨论
本研究表明在前列腺癌DU145细胞中，SATB1基因的沉默能够显著抑制细胞增殖，并且通过诱导细胞凋亡的手段来进行抗癌治疗是可行的。SATB1基因在许多癌症中都被认为是一个重要的促进因子。它不仅能促进细胞增殖和侵袭，而且也可以负责调节许多其他癌症相关基因的表达。RNA干扰技术能够特异性的靶向基因，实现基因沉默，在其他癌症领域中也有类似的应用文章发表。
结论
通过RNA干扰技术使SATB1沉默，可以有效抑制前列腺癌DU145的细胞增殖以及诱导细胞凋亡。该研究为基于SATB1的前列腺癌治疗提供了重要的基础实验依据。未来应继续进行更为深入的实验和临床研究，以期基于RNA干扰技术探索更有效的治疗方案。