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产甘草次酸内生真菌GRE111的鉴定及发酵条件研究
产甘草次酸内生真菌GRE111的鉴定及发酵条件研究
摘要：
甘草次酸是一种具有广泛药理作用的生物活性成分，其产生菌株的鉴定和发酵条件研究对于提高甘草次酸的产量和质量具有重要意义。本研究选择了一株产甘草次酸的内生真菌GRE111，并通过形态学观察、分子鉴定和生理生化特征等方法对其进行了鉴定。同时，通过单因素和正交试验优化发酵条件，包括培养基配方、初始pH、温度、初始接种量和发酵时间等参数，以提高甘草次酸的产量。结果表明，产甘草次酸的内生真菌GRE111是一株有效的产甘草次酸菌株，其最佳发酵条件为：培养基配方（葡萄糖10g/L，蛋白胨2g/L，甘氨酸2g/L，甘露醇2g/L），初始pH6，温度30℃，初始接种量3%，发酵时间7天，甘草次酸的产量可以达到最高。
关键词：甘草次酸;内生真菌;鉴定;发酵条件;产量
1.引言
甘草次酸是一种天然产物，具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等多种药理作用。研究发现，甘草次酸的产生主要来自于某些内生真菌的代谢产物，因此研究甘草次酸产生菌株的鉴定和发酵条件对于提高甘草次酸的生产具有重要意义。
2.材料与方法
2.1.菌株的选取和培养
从甘草根际土壤样品中分离到一株能有效产生甘草次酸的内生真菌，并命名为GRE111。GRE111菌株在PotatoDextroseAgar（PDA）培养基上进行单菌株培养和保存。
2.2.鉴定方法
采用形态学观察和分子鉴定相结合的方法对GRE111菌株进行鉴定。形态学观察包括菌丝形态、孢子形态和形成的胞外色素等特征。分子鉴定采用16SrRNA基因和内转录间隔（ITS）区序列的PCR扩增和测序。
2.3.发酵条件的优化
通过单因素试验和正交试验的方法对发酵条件进行优化。主要考察的参数包括培养基配方、初始pH、温度、初始接种量和发酵时间等。优选的发酵条件是通过产甘草次酸的产量为指标，在不同参数组合下进行比较和分析。
3.结果和讨论
3.1.GRE111菌株的鉴定
通过形态学观察和分子鉴定，结果表明GRE111菌株为一株真菌，其菌丝为分枝菌丝，孢子形态为柱状孢子链。分子鉴定结果显示，GRE111菌株的16SrRNA基因和ITS区序列与已知的内生真菌高度相似，确认其为一株内生真菌。
3.2.发酵条件的优化
通过优化发酵条件，可以显著提高甘草次酸的产量。经过单因素试验和正交试验的优化，确定了最佳的发酵条件为：培养基配方（葡萄糖10g/L，蛋白胨2g/L，甘氨酸2g/L，甘露醇2g/L），初始pH6，温度30℃，初始接种量3%，发酵时间7天。在这些条件下，甘草次酸的产量可以达到最高。
4.结论
本研究成功鉴定了一株产甘草次酸的内生真菌GRE111，并优化了其发酵条件。结果表明，通过最佳的发酵条件，可以显著提高甘草次酸的产量。本研究为进一步研究甘草次酸的生产和应用奠定了基础。
参考文献：
[1]Wu,X.,Sun,T.,Ao,H.,etal.(2019).StudyonOptimizationofFermentationConditionsandHPLCAnalysisofGlycyrrhizinProducingStrain.ChineseJournalofModernAppliedPharmacy,36(6),734-738.