巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳中复原乳检验方法.pdf

食品安全国家标准巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳中复原乳检验方法NationalfoodsafetystandardIdentificationofreconstitutedmilkinpasteurizedandUHTmilk（第一次讨论稿）中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部奶及奶制品质量监督检验测试中心（北京）农业部奶产品质量安全风险评估实验室（北京）前言本标准代替NY/T939―2016《巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳中复原乳的鉴定》。与NY/T939―2016相比，主要变化如下：——删除了术语和定义中生乳、热处理、巴氏杀菌、巴氏杀菌乳、超高温瞬时灭菌、超高温瞬时灭菌乳（UHT灭菌乳）的定义；——修改了糠氨酸测定方法中流动相条件；——完善了乳果糖测定方法中的试剂配制。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：——NY/T939―2005、NY/T939―2016。13范围本标准规定了巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳中复原乳的检验方法。本标准适用于巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳。14术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1复原乳reconstitutedmilk将干燥的或者浓缩的乳制品与水按比例混匀后获得的乳液。2.2糠氨酸Furosine牛乳在加热过程中，氨基酸、蛋白质与乳糖通过美拉德反应生成ε-N-脱氧乳果糖基-L-赖氨酸（ε-N-deoxylactolusyl-L-lysine），经酸水解转换成更稳定的糠氨酸（ε-N-2-furoylmethyl-L-lysine，ε-N-2-呋喃甲基-L-赖氨酸）。2.3乳果糖Lactulose牛乳在加热过程中，乳糖在酪蛋白游离氨基的催化下，碱基异构而形成的一种双糖。其化学名称为4-o-β-D-吡喃半乳糖基-D-果糖，可作为评价牛奶热处理效应的指标。15试验方法3.1糠氨酸含量的测定3.1.1原理试样经盐酸水解后测定蛋白质含量，水解液经稀释后用高效液相色谱（HPLC）或超高效液相色谱（UPLC）在紫外（波长280nm）检测器下进行分析，外标法定量。3.1.2试剂和材料注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的实验室一级水。3.1.2.1试剂3.1.2.1.1甲醇（CH3OH）：色谱纯。3.1.2.1.2浓盐酸（HCl，密度为1.19g/mL）：分析纯。3.1.2.1.3三氟乙酸：色谱纯。3.1.2.1.4乙酸铵：色谱纯。3.1.2.1.595%乙醇（C2H5OH）。3.1.2.1.6硫酸铜（CuSO4·5H2O）。3.1.2.1.7硫酸钾（K2SO4）。3.1.2.1.8硫酸（H2SO4，密度为1.84g/mL）。3.1.2.1.9硼酸（H3BO3）。3.1.2.1.10氢氧化钠（NaOH）。3.1.2.1.11溴甲酚绿指示剂（C21H14Br4O5S）。3.1.2.1.12亚甲基蓝指示剂（C16H18ClN3S·3H2O）。3.1.2.1.13甲基红指示剂（C15H15N3O2）。3.1.2.2试剂配制3.1.2.2.1盐酸溶液（3mol/L）：在7.5mL水中加入2.5mL浓盐酸，混匀。3.1.2.2.2盐酸溶液（10.6mol/L）：在12mL水中加入88mL浓盐酸，混匀。3.1.2.2.3乙酸铵溶液（6g/L）：准确称量6g乙酸铵溶于部分水中，定容至1L，过0.22μm水相滤膜，超声脱气10min。3.1.2.2.4乙酸铵（6g/L）含0.1%三氟乙酸溶液：准确称量6g乙酸铵溶于部分水中，加入1mL三氟乙酸，定容至1L，过0.22μm水相滤膜，超声脱气10min。3.1.2.2.5硼酸溶液（20g/L）：称取20g硼酸，用水溶解并稀释至1L。3.1.2.2.6氢氧化钠溶液（400g/L）：称取40g氢氧化钠加水溶解，冷却后，稀释至100mL。3.1.2.2.7甲基红乙醇溶液（1g/L）：称取0.1g甲基红，溶于95%乙醇并稀释至100mL。3.1.2.2.8亚甲基蓝乙醇溶液（1g/L）：称取0.1g亚甲基蓝，溶于95%乙醇并稀释至100mL。3.1.2.2.9溴甲酚绿乙醇溶液（1g/L）：称取0.1g溴甲酚绿，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100mL。3.1.2.2.10混合指示液A：2份甲基红乙醇溶液与1份亚甲基蓝乙醇溶液临用时混合。3.1.2.2.11混合指示液B：1份甲基红乙醇溶液与5份溴甲酚绿乙醇溶液。3.1.2.3标准品3.1.2.3.1糠氨酸：C12H17N2O4•xHCl。3.1.2.3.2盐酸标准滴定溶液（0.0500mol/L）。3.1.2.4标准溶液配制3.1.2.4.1糠氨酸标准储备溶液（500.0mg/L）：将糠氨酸标准品按标准品证书提供的肽纯度系数（NetPeptideContent）换算后，用3mol/L盐酸溶液配制成标准储备溶液。-20