高效液相色谱法测定盐酸溴己新片的含量.docx

高效液相色谱法测定盐酸溴己新片的含量高效液相色谱法测定盐酸溴己新片的含量【摘要】目的建立高效液相色谱法测定盐酸溴己新片的含量。方法色谱柱：AlltimaC18柱(4.6mm×150mm，5μm);流动相:乙腈?0.05mol·L-1磷酸盐缓冲液(含0.2%三乙胺，pH=3.0)(体积比30∶70)，流速1.0mL·min-1，检测波长为249nm。结果盐酸溴己新在66.0～96.4μg·mL-1浓度范围内线性良好(r=0.9999，n=5),平均回收率为98.85%(RSD=0.60%,n=6)。结论本法快速、简便、准确，重复性好。【关键词】高效液相色谱法;盐酸溴己新;含量测定Abstract:ObjectiveToestablishamethodforcontentdeterminationofbromhexinehydrochlorideintablets.MethodsBromhexinehydrochlorideinthetabletswasanalyzedonanAlltimaC18(4.6mm×150mm，5μm)columnwithmobilephasecomposedofacetonitrile?0.05mol·L-1phosphatebuffer(30∶70,finalpH3.0adjustedwith0.2%triethylamine).Theflowratewas1.0mL·min-1withUVdetectionwavelengthat249nm.ResultsCalibrationgraphwaslinear(r=0.9999,n=6)inconcentrationrange66.0?96.4μg·mL-1.Theaveragerecoveryofbromhexinehydrochloridewas98.85%andRSD0.60%(n=6).ConclusionsThemethodissimple,rapidandreproducible.Keywords:HPLC;bromhexinehydrochloride盐酸溴己新是一种临床上常用的祛痰药，疗效确切。目前盐酸溴己新的含量测定方法有紫外分光光度法[1]、HPLC法[2]和毛细管电泳法[3]，中华人民共和国药典2005年版收载的盐酸溴己新片的含量测定方法为紫外分光光度法，但该法测含量专属性不够强，易受辅料干扰[4]。为系统评价其药品质量，确保临床疗效，本文建立了高效液相色谱法测定盐酸溴己新含量的条件，并与紫外-可见分光光度法的测定结果做比较，结果表明高效液相色谱法更为简便、准确、专属性强。1、仪器与试药1.1仪器岛津LC?10AT型高效液相色谱仪，岛津SPD?10A紫外检测器;UV?2450型紫外?可见分光光度计1.2试药盐酸溴己新对照品(100427?200402，供含量测定用)购自中国药品生物制品检定所;盐酸溴己新片(广州南沙琪宝制药有限公司，批号20060805，20060807，20060810);乙腈为色谱纯，其余试剂为分析纯。2、方法与结果2.1色谱条件色谱柱：AlltimaC18柱(4.6mm×150mm，5μm);流动相：乙腈?0.05mol·L-1磷酸盐缓冲液(含0.2%三乙胺，pH=3.0)(体积比30∶70);检测波长249nm，流速1.0mL·min-1，进样量20μL。色谱图见图1。2.2溶液的制备2.2.1对照品溶液的制备精密称取10.6mg盐酸溴己新对照品，置25mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2mL至10mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，用0.45μm的微孔薄膜滤过，即得质量浓度为84.80μg/mL的对照品溶液。2.2.2供试品溶液的制备精密取样品0.15g，置于50mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2mL至10mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，0.45μm的微孔薄膜滤过，即得。2.2.3空白溶液的`制备将不含被分析成分的盐酸溴己新辅料混合均匀后，精密称取93.9mg到50mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。图1HPLC图谱略2.3线性关系考察分别精密吸取对照品溶液4、8、10、16、20μL,进样测定峰面积。以色谱峰峰面积(A)为纵坐标,对照品进样量(m)为横坐标,绘制标准曲线并进行线性回归,得回归方程：A=27251m-120995(r=0.9999，n=5)，结果表明,盐酸溴己新的进样量在66.0～96.4μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,线性范围是33.92～169.6μg·mL-1。2.4精密度试验取同一对照品溶液，按上述色谱条件，连续进样6次，每次20μL，测定峰面积，结果峰面积的RSD为0.59%，表明精密度良好。2.5稳定性试验取同一供试品溶液，