课题2 月季的花药培养.doc

【学习目标】
a.被子植物花粉的发育过程。
b.被子植物产生花粉植株的两种途径。
c.影响花药培养的因素。
【知识梳理】
一、基础知识
(一)被子植物的花粉发育
1.雄蕊
雄蕊组成：花药（囊状结构，内有很多花粉）和花丝。
2.花粉
花粉的产生：由花粉母细胞（小孢子母细胞）历经减数分裂、有丝分裂而形成，是单倍体的生殖细胞。
3.被子植物花粉的发育过程
被子植物花粉发育经历小孢子四分体时期、单核期、双核期等阶段。
（二）产生花粉植株的两种途径
1.产生花粉植株（即单倍体植株）的两种途径：一是花粉通过胚状体阶段发育为植株，二是通过愈伤组织阶段发育为植株。这两种途径的区别主要取决于培养基中激素的种类及其浓度的配比。
2.体细胞胚（胚状体）：在组织培养过程中，某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似，被称为体细胞胚（胚状体）。
来源：直接由器官产生；由单个细胞产生；由愈伤组织产生。
（三）影响花药培养的因素
1.材料的选择
①从花期来看，应当选择初花期的花药。
②从花粉来看，应当选择单核期的花粉。
③从花蕾来看，应当选择完全未开放的花蕾。
2.其他影响因素[来源:学#科#网Z#X#X#K]
（1）培养基的组成
（2）亲本生长条件、材料低温处理、接种密度等
生长旺盛植株花药较易形成花粉植株；栽培条件的好坏也影响花粉植株的诱导率。
（3）适宜的培养条件等
25℃左右，花粉培养的早期，黑暗或弱光有利于花粉分裂的启动。[来源:Z*xx*k.Com]
二、实验操作
（一）材料的选取
材料选取的两种方法：醋酸洋红法、焙花青-铬矾法溶液配制和操作。
（二）材料的消毒
（三）接种和培养
（1）剥取花药
（2）接种
（3）培养
①培养条件：
温度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。
②培养：
一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体长出，愈伤组织则将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。[来源:Z,xx,k.Com]
（4）鉴定和筛选
【课前热身】
1.如图是花药培养产生花粉植株的两种途径，下列相关判断错误的是()

A.图中的a是愈伤组织
B.①和②过程的实质相同
C.选择的花药在花粉发育过程中越早越好
D.整个培养过程中的细胞增殖方式只有有丝分裂
【答案】C[来源:Z_xx_k.Com]

2．用组织培养技术繁殖一种名贵花卉的过程中，下列叙述不正确的是（）
A.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又減少消毒剂对细胞的伤害
B.在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞
C.用花粉离体培养可获得单倍体植株，说明花粉细胞仍具有全能性
D.诱导愈伤组织生根时，培养基内通常应含生长素类调节剂
【答案】B学科&网
【解析】外植体消毒既要杀死材料表面的微生物，消毒剂还不能对细胞有伤害，A正确。在愈伤组织培养中进入细胞融合的诱导剂，因为愈伤组织有细胞壁，细胞不能融合，所以无法得到染色体加倍的细胞，B错误。用花粉离体培养可以得到单倍体植株，说明花粉细胞具有全能性，C正确。诱导愈伤组织生根时，培养基中生长素类应高于细胞分裂素类含量，D正确。
3．接种和培养花药时应注意的事项全对的一组是（）
①不损伤花药②彻底去除花丝③幼小植株形成后需要光照④花药开裂释放出的幼小植株会分别发育成单倍体植株
A.①②③B.①②④C.②③④D.①③④
【答案】A
【解析】接种和培养花药时应注意不损伤花药，彻底去除花丝和幼小植株形成后需要光照。学科&网
4．选择花药时，一般要通过镜检来确定花粉的发育时期，以下说法正确的（）
A.确定花粉发育时期最常用的方法是焙花青-铬矾法
B.对某些植物的花粉细胞核不易着色时采用醋酸洋红法
C.焙花青-铬矾法能将细胞核染成蓝黑色
D.醋酸洋红法和焙花青-铬矾法染色过程完全一样
【答案】C

5.下列有关月季花药培养的实验操作中，不正确的是（）
A.花药培养可在同一培养基上培养至长出幼小植株再更换培养基继续培养[来源:学科网ZXXK]
B.镜检花粉时可用醋酸洋红法或焙花青﹣铬矾法染色，后者能将花粉细胞核染成蓝黑色
C.在剥离花药时，要尽量不损伤花药，否则易从受伤部位产生愈伤组织
D.如果接种的花药长出愈伤组织并分化成幼小植株，还需对植株作进一步的鉴定和筛选
【答案】A
【解析】花药离体培养形成愈伤组织后必须转移至分化培养基上才能得到幼小植株；选择花药时，确定花药发育时期最常用的方法是醋酸洋红法，某些植物的花粉不易着色需采用焙花青﹣铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色；在花药离体培养中剥离花药时，要尽量不损伤花药，否则接种后容易从受伤部位产生愈伤组织，同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药，不利于愈伤组织或胚状体的形成；如果