实验四.果蝇的形态和生活史观察.doc

实验四：普通果蝇的形态和生活史观察
一、目的：
了解果蝇的生活习性；
掌握果蝇培养基的配置方法；
掌握果蝇饲养管理的方法；
鉴定果蝇的雌雄性别和突变性状。
原理：
果蝇，别名：fruitfly双名法：Drosophilamelanogaster。果蝇属于动物界、节肢动物门、昆虫纲、双翅目、果蝇科、果蝇属。双翅目昆虫具有一对发达、膜质的前翅，后翅特化为一对平衡棒。果蝇的生活周期长短与温度密切相关，30℃以上的温度能史果蝇不育和死亡，低温则史它生活周期延长。同时生活力也降低，故果蝇培养的最适温度为23-25℃。果蝇在水果摊或果园里常可以见到，但它并不是以水果为生的，而是食生长在水果上的酵母菌。因此，实验室内凡是能发酵的基质均可作为果蝇饲养的饲料。较好的配方如下：
A:糖6.2克、加琼脂0.62克、再加水38ml,煮沸溶解。
B：玉米粉8.25克、加水38ml、加热搅拌均匀后，再加0.7克酵母粉。
A和B混合加热成糊状后，再加0.5ml丙酸，即可分装到培养瓶中。除此之外还有米粉饲料和香蕉饲料也可以用来培养果蝇。
果蝇用做实验材料的优点是生活周期短，每12天左右即可完成一个世代。繁殖力较强，每个受精的雌蝇均可产卵400-500个，因此在短周期内可获得多数子代，有利于遗传学分析。培养条件简易可行，突变型多属形态变异，便宜观察。因此，在遗传学中得到广泛应用，是一种模式生物。
果蝇的雌、雄辨别主要有以下依据：
雌：形体较大；腹部末端色浅，腹部背面成五条黑色条纹；腹部末端稍尖；六个腹片，腹部底部产卵管呈圆锥状凸出。
雄：形体较大；腹部末端黑色，腹背三条条纹，最后一条极宽并延伸到腹面呈一明显黑斑；腹部末端呈钝圆形；四个腹片，腹尖底部为交尾器，呈现黑色，圆形外观；在第一对足的跗节基部有性梳（黑色鬃毛结构，形似一小梳）。
果蝇突变性状常见的有：棒眼、褐眼、卷曲翅、小翅、白眼、黑檀体、黄体、残翅、叉毛、黑体、黑色眼、焦刚毛等等。
二仪器、材料及试剂：
设备：高压蒸汽灭菌锅、恒温培养箱（DNP-9272型）、锑锅、电炉、烧杯（500ml）、培养瓶（50ml锥形瓶）、双筒解剖镜、棉花塞、玻璃棒、镊子、漏斗、滤纸、石棉网
材料：黑腹果蝇
试剂：乙醚、酒精、酵母粉、琼脂、玉米粉、白糖、蒸馏水
三步骤
收集果蝇
将烂水果放在饮料瓶内引诱果蝇，待收集到一定数量的果蝇后盖上瓶盖。
培养基的配置
A:糖6.2克、琼脂0.62克、蒸馏水38ml
B:玉米粉8.25克、蒸馏水38ml、酵母粉0.7克
每一个饲养瓶内分装约20ml左右，根据组员数按照配方比例算出所需物品量称取物品，按组分分别放入两个大烧杯中。A杯：煮沸溶解，B杯:玉米粉加水加热搅拌均匀后再加酵母粉。A、B混合加热成糊状后，加0.5ml（按照放大比例加）丙酸，即可分装到饲养瓶中。每一饲养瓶装好后，立即塞上塞子，放在一旁备用。
培养基灭菌：
分装完成后，将剪好的滤纸（用于吸收水分和供给幼虫化蛹的场所）和饲养瓶一同放入高压灭菌锅内灭菌30分钟。灭菌时严格按照高压灭菌锅灭菌规则进行。

果蝇的接种：
将灭好菌的滤纸在无菌操作条件下插入饲养瓶中，塞好棉塞放在一旁备用。
果蝇的麻醉：
将果蝇从收集中转移到麻醉瓶中进行麻醉，收集瓶中有腐烂的水果，要是在收集瓶中麻醉，果蝇会粘在腐烂的水果上，不易操作。具体步骤如下：
A：轻拍收集瓶，是果蝇落于其底部；
B:取下收集瓶盖，将其与麻醉瓶紧密对接：
C：左手紧握两瓶接口处，转动是收集瓶斜向上：
D:右手轻拍收集瓶是将果蝇震落到麻醉瓶中；
E:分开两瓶，盖好麻醉瓶盖；
F：将麻醉瓶的果蝇轻拍到瓶底，迅速打开盖子，用镊子夹住蘸有乙醚的棉球塞住瓶口，待大多数果蝇行动迟缓或者不再爬动后拿开棉球，用毛笔将果蝇转移到白瓷板上。如果果蝇翅膀与身体成45°时，表明麻醉过度，果蝇已经死亡；
G：用毛笔在无菌操作条件下降果蝇接种到饲养瓶中，每个饲养瓶分样6-12只左右，接种完成后，将饲养瓶放入恒温箱中培养，温度设为25℃。

果蝇形态和生活史观察
（1）雌、雄果蝇的鉴别：

♀
♂
体型较大
体型较小
腹部末端色浅，腹部背面成五条黑色条纹
腹部末端黑色，腹背三条条纹，最后一条极宽并延伸到腹面呈一明显黑斑；
腹部末端稍尖；
腹部末端呈钝圆形；
六个腹片，腹部底部产卵管呈圆锥状凸出
四个腹片，腹尖底部为交尾器，呈现黑色，圆形外观；在第一对足的跗节基部有性梳

下图注释：
左：雄性果蝇的左前足??中：跗节基部的性梳???右：雌果蝇无性梳
C、基节TR、转节?F、腿节?TI、胫节?TA、跗节

雄雌左右

（2）果蝇个时期的形态特点：
卵：卵白色，长椭圆形，长约0.5-0.7mm，在背面的前端伸出一对触丝，它能使卵附着在柔软的食物上，不至于深陷到食物中去。
幼虫：一龄—二龄—三龄，幼虫从卵中孵化出来后，