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一、系统组成二、准备四、参数设定五、更换流动相并排气泡六、平衡系统六、平衡系统六、平衡系统七、进样八、谱图的判断及结果计算八、谱图的判断及结果计算八、谱图的判断及结果计算九、清洗管路及进样口九、清洗管路及进样口【特殊情况】:谱流路系统,从泵、进样器、色谱柱、到检测器通池,在分析完毕后,均应按(5.1)充分冲洗,特别是用过含盐流动相的,更应注意先用水,再用甲醇-水,充分冲洗。谢谢大家!第二节岛津LC-10AT型HPLC注意事项 一、流动相二、样品三、色谱柱三、色谱柱四、操作过程四、操作过程四、操作过程四、操作过程四、操作过程四、操作过程自己总结的12条注意事项1、流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。 2、流动相过滤后要用超声波脱气,脱气后应该恢复到室温后使用。 3、不能用纯乙腈作为流动相,这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。 4、使用缓冲溶液时,做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时,然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上,以充分洗去离子。对于柱塞杆外部,做完样品后也必须用去离子水冲洗20ml以上。 7.C18柱绝对不能进蛋白样品,血样、生物样品。 8.堵塞导致压力太大,按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗。 清洗方法:①以异丙醇作溶剂冲洗;②放在异丙醇中间用超声波清洗;③用10%稀硝酸清洗。 9.气泡会致使压力不稳,重现性差,所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。 10.如果进液管内不进液体时,要使用注射器吸液:通常在输液前要进行流动相的清洗。 11.要注意柱子的PH值范围,不得注射强酸强碱的样品,特别是碱性样品。 12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边清洗,然后插入新的流动相中。更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。 谢谢大家!第三节高效液相色谱中常遇见的问题及处理方法一、保留时间变化二、保留时间缩短三、保留时间延长四、出现肩峰或分叉五、鬼峰六、基线噪声七、峰拖尾八、峰展宽八、峰展宽谢谢!

天马****23
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