酶标仪参数及性能检测_曾俊.pdf

第21卷第3期汕头大学医学院学报Vol21No3
2008JournalofShantouUniversityMedicalCollege2008

酶标仪参数及性能检测

曾俊,张丹桂,王革非,陈小璇,李康生
(汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室,广东汕头515041)

[摘要]目的:检测BioRad3550UV型酶标仪是否仍能应用于精密的酶联免疫吸附实验(ELISA)的检测。方法:对BioRad
3550UV型酶标仪的一些重要参数(滤光片精度,检测结果可重复性,线性相关性以及通道间的差异等)进行检测,同时与新
型酶标仪作比较。结果:BioRad3550UV酶标仪各项重要参数均符合检测要求。结论:BioRad3550UV酶标仪仍然能应用于
精密的ELISA检测。
[关键词]酶标仪;性能检测;参数检测
[中图分类号]R44661[文献标识码]A[文章编号]10074716(2008)03017602

酶标仪是实验室的常用贵重仪器,主要应用于123线性相关性及通道间差异检测取一排洁
酶联免疫吸附实验(ELISA),检测样本吸光度值。净的酶标板条(8个小孔杯),依次加入重铬酸钾溶
随着科学技术的不断发展,酶免疫分析法的自动化液,每孔100L,第8孔加入蒸馏水作空白对照。
程度及精确性有了很大的提高,其在生物医学和临以酶标板架为载体,先后把酶标板条置于8个通
床检验中的应用越来越广泛。1993年我室购买了道:线性相关性检测:用450nm波长(参考波长
BioRad3550UV酶标仪,我们对该仪器的一些重要630nm)对每个通道连续检测5次,取均值,对吸
参数(滤光片精度,检测结果可重复性,线性相关光度与稀释度作线性相关分析。通道间差异检
性以及通道间的差异性等)进行了检测,同时与新测:取8个通道中的最高OD值(H)、最低OD值
型酶标仪作了比较。(L),计算通道间差异率((HL)/(H+L))。通道间
差异率应15%。
1材料与方法
124与新型同类仪器比较将同一样本分别在
11材料BioRad3550UV、SPECTRAMAX190及SPECTRA
MAX340PC酶标仪上检测,对比分析检测结果。
BioRad3550UV酶标仪(BioRad公司,美国),
SPECTRAMAX190和SPECTRAMAX340PC酶标仪2结果
(MD公司,美国),酶标板(biomat);DU640紫外
21滤光片波长精度检查
可见光分光光度计(BECKMAN公司,美国)。重铬
酸钾:配制质量浓度5mg/mL的重铬酸钾溶液,再滤光片的精度如何直接影响仪器的灵敏度和检
对其进行连续倍比稀释得到T1~7,其质量浓度分测结果。对本仪器的滤光片用分光光度计检测,滤
别为5、25、125、0625、0313、0156、0078光片的精度均小于5,说明滤光片质量可靠(表1)。
表1分光光度计检测滤光片的精度
mg/mL。
Table1Accuracyoffiltersdetectedbyspectrophotometer
12方法(滤光片标示值)/nm
405450490575630
121滤光片波长精度检查采用高精度紫外可(分光光度计检测值)/nm407454495573631
(精度)/nm24521
见光分光光度计对不同波长的滤光片进行光谱扫
描,所得检测值与滤光片标定值之差称为滤光片的22仪器的重复性检查
精度,精度<5为正常,差值越接近于零说明精度
在仪器可测范围(OD010~200)内重复性误
越高[1]。
122仪器的重复性检查对同一孔用450nm波
收稿日期:2008-06-03
长[2](参考波长630nm)连续测5次,取最高OD值
作者简介:曾俊(1982-),男,湖北省仙桃市人,汕头大学
(H)、最低OD值(L),计算重复误差率(dev/%)医学院在读硕士生。
((HL)/(H+L))。重复误差率应05%。通信作者:李康生Email:[e-mail]
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第3期曾俊等.酶标仪参数及性能检测

差率<05%,在OD值低于0005时误差较大(表表3同一酶标条在不同通道间的OD值*
2)。Table3ODvaluesofthesamesampleindifferentchannels
表2倍比稀释浓度重铬酸钾检测仪器的重复性倍比稀释浓度
通道
Table2DetectionofreproducibilityindifferentdilutionsofpotasT1T2T3T4T5T6T7
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