土壤中分解尿素的细菌的分离与计数53349.pptx

会计学尿素[CO(NH2)2]——重要的农业氮肥。
只能被土壤中细菌分解为NH3才能被植物吸收利用
CO(NH2)2+H2OCO2+2NH3
二、研究思路15.0g（二）统计菌落数目：
1、活体计数法（稀释涂布平板）
（1）操作方法：
稀释涂布平板→统计菌落数
（2）原理：
1个菌落→1个活菌
（3）统计原则
①选30∼300个菌落的平板统计
②每个稀释度取3个平板取其平均值例：两位同学用稀释涂布平板法测定同
一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为
106的培养基中，得到以下两种统计结果。
1、甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230。
2、乙同学在该浓度下涂布了A、B、C三个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学以这三个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。
你认为这两位同学的作法正确吗？如果有问题，错在哪？（二）统计菌落数目
1、活菌计数法
（4）统计结果：统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，因此统计结果一般用菌落数表示。
每克样品中的菌株数=（C/V)*M
C:某一稀释度下平板上生长的平均菌落数；
V:所用稀释液的体积；M:稀释倍数。/利用选择培养基进行尿素分解菌的分离过程中，从对应稀释倍数为106的培养基中，A、B两同学分别得到以下两种统计结果。
1、A同学筛选出150个菌落。
2、B同学筛选出50个菌落。
B认为A的培养基被杂菌污染了，或培养基中混入了其他含氮物质，因而导致不能分解尿素的细菌也能在该培养基中生长。A确认自己的操作无误，但也拿不出能令人信服的证据。
请你帮助A同学改进实验，提供具有说明了的证据。四、实验过程（二）样品稀释
（1）测细菌数：一般用104、105、106稀释液
（2）测放线菌：一般用103、104、105稀释液
（3）测真菌数：一般用102、103、104稀释液
原则：确保平板上的菌落数在30∼300之间。
（三）微生物的培养与观察
1、接种：用适当的稀释液作涂布平板
2、培养：细菌：30∼37℃，1∼2d;
放线菌:25∼28℃,5∼7d;
霉菌:25∼28℃,3∼4d.
3、观察：a.每24h统计一次菌落数目
b.以“稳定菌落”为观察对象
（四）鉴定：筛选后必鉴定
鉴别培养基：不影响微生物的生存
酚红培养基：
鉴定分解尿素的细菌。
原理：脲酶催化尿素分解成氨→培养基碱性增强→酚红变红→脲酶阳性在一定的培养条件下（相同的培养基、温度及培养时间），同种微生物表现出相同而稳定的菌落特征。关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。大肠杆菌呈黑色中心,有或无金属光泽
1.使用选择培养基的目的是（）
A.培养细菌
B.培养真菌
C.使需要的微生物大量繁殖
D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别
2.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是()
A.CO2和N2B.葡萄糖和NH3
C.CO2和尿素D.葡萄糖和尿素4.下列说法不正确的是（）
A.科学家从70－80度热泉中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶
B.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数的估计值
C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度
D.同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。

5.为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌，常在培养基中加入（）
A.较多的氮源物质B.较多的碳源物质
C.青霉素类药物D.高浓度食盐巩固练习(2016四川卷)图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列。(2016四川卷)图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列。空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：
①配置培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O）;
②制作无菌平板；
③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；
④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。回答下列问题:
（1）该培养基中微生物所需的氮来源于______________。若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是________。
（2）步骤③中，实验组的操作是
____________________________________________________________。某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不