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会计学课题21、常见的分解尿素的微生物启示:寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。1、实验室微生物的筛选原理(P21)2、选择培养基1.在培养基的配方中,为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是是什么物质?二、统计菌落数目(二)微生物计数每一个大方格边长为1mm,则每一大方格的面积为1mm2,盖上盖玻片后,载玻片与盖玻片之间的高度为,所以计数室的容积为3。2、统计菌落数目——稀释涂布平板法平板菌落数统计注意事项某班级菌落数统计表格【例1】某同学在稀释倍数为106的培养基上测得平板上的菌落数的平均值为234,那么每毫升样品中菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL) A.2.34×108B.2.34×109 【解析】选B。稀释倍数为106,0.1mL稀释液的菌落数的平均值为234,则每毫升样品中菌落数就为234/0.1×106= 2.34×109。思考2:为什么测平板上的菌落数可以推测样品中的活菌的数目?思考3:统计的菌落数往往比活菌的实际数目高还是低,为什么?第一位同学只涂布了一个平板,没有设置重复组,因 此结果不具有说服力。 第二位同学考虑到设置重复组的问题,涂布了3个平板,但是,其中1个平板的计数结果与另2个相差太远,说明在 操作过程中可能出现了错误,因此,不能简单地将3个平 板的计数值用来求平均值。启示实例分析2实例分析2实例分析实验结果要有说服力,对照的设置是必不可少的!(三)实验基本原则实验名称:土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 实验原理: 实验目的: 材料用具: 方法步骤:1、分组编号 2、处理(遵循实验设计的基本原则) 对照原则、单一变量原则(等量原则) 科学性原则、平行重复原则 可行性原则 3、观察记录(设计观察记录表) 实验预期: 实验结果的分析与评价: 实验结论:实验名称:土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 实验原理: 实验目的: 材料用具: 方法步骤:1、分组编号 2、处理(遵循实验设计的基本原则) 对照原则、单一变量原则(等量原则) 科学性原则、平行重复原则 可行性原则 3、观察记录(设计观察记录表) 实验预期: 实验结果的分析与评价: 实验结论:实验设计土壤中分解尿素的细菌的分离与计数制备5个牛肉膏蛋白胨培养基和15个选择培养基,准备好无菌试管和移液管。制备5个牛肉膏蛋白胨培养基和15个选择培养基,准备好无菌试管和移液管。 注:每个稀释度下需要3个选择培养基(平行重复原则),1个牛肉膏蛋白胨培养基。选用稀释倍数为103~107的稀释液。因为土壤中各类微生物的数量(单位:株/kg)是不同的,例如在干旱土壤中的上层样本中:好氧及兼性厌氧细菌数约为2185万,放线菌数约为477万,霉菌数约为万。因此,为获得不同类型的微生物,就需要按不同的稀释度进行分离,同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。测定土壤中细菌的数量,一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养;测定放线菌的数量,一般选用103、104和105倍稀释液;测定真菌的数量,一般选用102、103和104倍稀释液。将10g土样加入盛有90mL无菌生理盐水的锥形瓶中,充分摇匀,吸取上清液1mL,转移至盛有9mL水的无菌试管中,依次等比稀释至107稀释度,并按照由107至103稀释度的顺序分别吸取进行平板涂布操作。按照浓度从低到高的顺序涂布平板,不必更换移液管。/将涂布好的培养皿放在30℃下培养。比较牛肉膏培养基和选择培养基中菌落的数量、形态等,并做好记录。 不同种类的微生物,往往需要不同的培养温度和培养时间。细菌一般在30~37℃的温度下培养1~2d;放线菌一般在25~28℃的温度下培养5~7d;而霉菌一般在25~28℃的温度下培养3~4d。一般来说,在一定的培养条件下(相同的培养基、温度及培养时间),同种微生物表现出稳定的菌落特征。当菌落数目稳定时,选取菌落数在30~300的平板进行计数。在同一稀释度下,至少对3个平板进行重复计数,然后求出平均值,并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。操作提示课题延伸 1、结合对照,分析培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出一些菌落。 2、是否获得了某一稀释度下,菌落数目在30——300的平板。在这稀释度下,是否至少有两个平板的菌落数相近? 3、你统计的每克土壤中含有能分解尿素的细菌的菌落数是多少?与其他同学的结果接近吗?如果差异很大,可能是什么原因引起的?——滤膜法(一)空气中微生物总数的检测 (二)水中细菌总数的检测 (三)牛奶中细菌的分离与计数 (四)土壤中真菌(或放线菌)的分离与计数/

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