月季抗白粉病基因Mlo的克隆和功能分析的中期报告.docx

月季抗白粉病基因Mlo的克隆和功能分析的中期报告
本次中期报告分为两部分，第一部分是月季抗白粉病基因Mlo的克隆，第二部分是基因功能分析。
第一部分，月季抗白粉病基因Mlo的克隆
1.实验背景：
白粉病是月季生产中的一个主要病害，严重影响月季产量和质量。研究表明，Mlo基因是一种潜在的白粉病抗性基因。因此，克隆月季Mlo基因可以为进一步研究月季抗白粉病机制提供基础和参考。
2.实验方法：
根据其他物种中Mlo基因序列进行比对，设计了一对特异引物进行PCR扩增反应。将PCR产物克隆到pMD18-T载体中进行测序，并进行序列比对和分析。
3.实验结果：
PCR反应得到了一条大约1500bp的DNA片段。测序确认了这是月季的Mlo基因序列。序列长度为1349bp，该序列与其他物种的Mlo基因序列比对，发现存在高度同源性，说明已经成功克隆出了月季的Mlo基因。
第二部分，基因功能分析
1.实验背景：
为了研究月季Mlo基因在白粉病抗性中的作用，本实验选择了两个月季品种，一个是抗白粉病品种，一个是易感品种。将月季Mlo基因转化到两个品种中，通过对转基因和对照品种的病害表现进行比较，探究Mlo基因在月季中的功能。
2.实验方法：
将已经克隆出的Mlo基因片段构建到植物表达载体pCAMBIA1302中，并将其转化到两个月季品种中。通过PCR和Southernblotting进行基因的检测和鉴定。用枯草芽孢杆菌感染两个品种的植株，对照组和转基因组在枯草芽孢杆菌感染后进行病症表现的观察和比较。
3.实验结果：
转基因和对照组感染枯草芽孢杆菌后，对照组月季叶片出现了明显的白粉病症状，而转基因组叶片的病害程度减轻，甚至有些完全没有发病。通过PCR和Southernblotting的检测和鉴定，确认了转基因和对照组均成功转化了Mlo基因。说明Mlo基因能够有效提高月季对白粉病的抵抗能力。
综上，本次中期报告完成了月季抗白粉病基因Mlo的克隆和基因功能分析实验，为进一步深入研究月季抗病机制提供了重要的基础和参考。