抗头孢噻呋多克隆抗体和抗氯霉素多克隆抗体制备的研究.docx

抗头孢噻呋多克隆抗体和抗氯霉素多克隆抗体制备的研究
引言：
头孢噻呋是一种广谱抗生素，它属于第三代头孢菌素，广泛适用于革兰阴性和革兰阳性细菌引起的感染病症，如：呼吸道感染、泌尿系统感染、皮肤软组织感染等，常用于治疗临床常见的疾病。然而，由于人体中存在各种抗体，抗生素治疗难免会引起人体对药物的免疫，例如：头孢噻呋过敏、抗生素耐药性等问题。因此，针对这些药物引起的免疫问题，研究抗体制备技术，能够为治疗和预防这些问题提供一定帮助。
一、头孢噻呋多克隆抗体的制备
（一）采集抗原
采集头孢噻呋，使用动物腹腔注射法，将头孢噻呋与完全佐剂充分混合，注入小鼠腹腔中，以免疫其产生头孢噻呋特异性抗体。
（二）准备卵黄提取物
将爆裂的卵黄加入PBS缓冲液中，悬浮并超声分散，促进卵黄的细胞膜的破裂，并使卵黄中的蛋白变成溶解状态。
（三）卵黄抗体纯化
将卵黄提取物与头孢噻呋免疫小鼠的血清混合，等离子体与抗原结合形成复合物。复合物通过超速离心分离，获得复合物沉淀，重复冷冻再次离心可提高抗体净化程度。
（四）鉴定抗体效价
采用ELISA方法，将头孢噻呋免疫小鼠的抗体溶液分别稀释，将其与钵中的快速检测头孢噻呋试纸片的检测液混合，观察反应变化，并根据半量抗体抑制试验中出现的底物酶反应，以确定准确的抗体效价，以此作为制备头孢噻呋多克隆抗体的基础。
二、氯霉素多克隆抗体的制备
（一）制备抗原
采用化学合成法和病原体的方法来制备氯霉素抗原，先通过蛋白质层析纯化来获得高纯度的氯霉素结构类似物，然后将其注入免疫小鼠。
（二）免疫动物
选用高敏感性和易于免疫的动物，如小鼠等免疫氯霉素抗原，注射二价联合免疫或多价联合免疫技术等方法，提高免疫效果。
（三）采集免疫血清
在注射氯霉素抗原后，提取免疫小鼠的全血，离心成分将血清取出，通过离心、过滤等操作方法来去除血细胞成分，得到高质量的血清。
（四）分离和纯化免疫球蛋白
利用硫酸铵盐析法、离子交换层析法、凝胶过滤等多种方法分离得到免疫球蛋白。离子交换层析法能够分离特异性不同的免疫球蛋白，凝胶过滤法可以将大分子量的免疫球蛋白分离，并去除污染物，获得高纯度、高效价的免疫球蛋白。
（五）鉴定抗体效价
采用间接ELISA技术，将免疫球蛋白与待检氯霉素样品联合，进行细胞底物酶标记及检测，观察客体酶反应，并配合样品浓度标准曲线，测得最大阳性反应浓度，作为制备氯霉素多克隆抗体的基础。
结论：
制备抗体是一种有效的手段，能够克服对药物的过敏反应和耐药性问题。通过制备头孢噻呋多克隆抗体和氯霉素多克隆抗体，可以为各种药物的临床上应用提供较为严密和有效的保障。在制备多克隆抗体的过程中，需要高度重视品质控制和效价检测，以获得标准、高效的抗体制品，最终达到提高药物治疗效果和安全性的目的。