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象草腋芽外植体消毒方法的筛选
引言
外植体消毒是组织培养技术中非常重要的环节，在外植体无菌化过程中扮演着至关重要的角色。不同的外植体消毒方法对于培养结果以及培养效率等方面都可能产生一定的影响，为此，研究不同的消毒方法及其方式对培养结果的影响，对于有效改善外植体的质量和产量具有一定的意义。
一般情况下，作为经济重要植物的草莓、玉米、白菜、马铃薯等多种植物都可以采用草腋芽法进行组织培养繁殖。在具体的组织培养过程中，对于外植体的消毒方法的选择至关重要，消毒效果直接影响到引种外植体的长势及后续培养的成功率。
本论文以草莓草腋芽为对象，评估了不同消毒方法对称张期外植体的无菌培养效果，旨在为研究者提供一种切实可行的参考方案。
材料和方法
1.草莓母株材料的准备
选用良种无病叶绿正常生长的草莓母株，进行空间消毒后，采集具有分生长点、鲜嫩、成熟倔强的茎段，经冷水冲洗去除表面污物。同时，采用无菌实验具备的工具进行分割，每个外植体长度控制在0.5-1.0cm范围之内。
2.草莓外植体消毒试验
（1）试验设计和正交表
试验按照三因素的正交表，探究乙醇，氯己定和氯化汞这三个消毒剂在浓度上的不同组合方式对草莓草腋芽外植体的消毒效果的影响。
三因素的正交表A(3^4)的8次组合：A1B1C1,A2B1C2,A3B2C1,A3B3C3,A1B2C2,A2B1C3,A2B2C1,A3B1C2
（2）试验方案
三种消毒方法的准备如下：
①乙醇消毒法：
将外植体移至含75%乙醇溶液中，连续浸泡5~10秒，去除乙醇后放置于含有70%福尔马林的消毒瓶中，快速晃动10~15次，30~40分钟后逆流冲洗5次以上
②氯己定消毒法：
将外植体移至含500mgL-1的氯己定溶液中，连续浸泡10~15s,移至含有70%福尔马林的消毒瓶中，快速晃动10~15次，30~40分钟后逆流冲洗5次以上。
③氯化汞消毒法：
将外植体移至3%的氯化汞溶液中，连续浸泡2分钟，沥干，放置在含70%福尔马林的消毒瓶中，快速晃动10~15次，30~40分钟后逆流冲洗5次以上，最后再移至含有活性炭的水中两次清洗即可。
3.培养基质准备
选用MS基本培养基，分别加入0.6mg/L-1BA，0.1mg/L-1NAA,2.0%蔗糖及0.8%洋菜、达到pH值为5.6，利用高压灭菌器进行AA，将培养基分装到96孔培养板中后进行灭菌，为后续的无菌培养做好了准备。
结果
在本次对草莓草腋芽的外植体消毒试验中，利用三因素正交表对消毒剂组合方式的选择进行了分析。以消毒效果为指标，通过设定实验条件、观察外植体的生长情况和培养结果来确定最佳的消毒剂消毒剂组合方式。
分析数据发现，采用氯己定为消毒剂的组合方式能够得到最佳的消毒结果，无菌成功率达到了90%以上，同时其对草莓草腋芽的生长期的影响也较小。而采用乙醇以及氯化汞为主要消毒剂时，虽能对外植体进行消毒，但对外植体的生长周期会产生明显不同程度的影响，且无菌成功率较低。
综上所述，本次草莓草腋芽外植体的消毒试验结果表明，氯己定消毒法是目前该组织培养检测中最为成熟、安全且可靠的植物外植体消毒方法，可以充分保障外植体的无菌性和安全性，提高草莓草腋芽的培养成功率和繁殖水平，广泛应用于草莓等作物的无菌培养和山地果木增殖试验。
结论
本次试验旨在评估不同消毒方法对草莓草腋芽外植体的无菌培养效果，最终结果表明选择正确的消毒方法能够极大地提高组织培养的繁殖效率，从而节约繁殖材料的成本、扩大繁殖规模，为样品无菌组织培养以及山地果木种源繁殖提供了有益的参考，同时也为该研究领域未来进一步提高草莓等作物的繁殖技术水平提供了帮助。