切花菊转CcSOS1与CcSOS1-CdICE1双价基因研究.docx

切花菊转CcSOS1与CcSOS1-CdICE1双价基因研究
引言：
盐胁迫是全球主要的影响作物生产的逆境条件之一。花卉作为一类非粮食作物，也受到盐胁迫的影响。盐胁迫可以导致植物生长受限、生理代谢异常、光合作用受损等。虽然已经有很多研究关注盐胁迫逆境响应机制，但是在花卉方面的研究还相对较少。
本研究利用生物信息学方法，克隆了切花菊（Chrysanthemummorifolium）中的SOS1基因（CcSOS1），并通过转化技术和双价基因重组实现在酵母中的表达。同时，本研究探究了CcSOS1与CdICE1（花生花生四烯酸脱水酶基因）在酵母中共同表达时对盐胁迫的响应。
方法：
1.生物信息学分析
通过NCBI数据库和ChrysanthemumDB数据库的序列比对分析获得CcSOS1基因的序列。利用基因组浏览器，在某些物种中比对CcSOS1基因的组织表达模式。
2.基因克隆
利用RT-PCR方法从切花菊中克隆出CcSOS1基因的cDNA序列，并将其与pYES2载体进行克隆重组。
3.酵母转化
将pYES2-CcSOS1重组质粒转化入酵母菌株Saccharomycescerevisiae中，选择菌落进行筛选和培养。
4.双价基因重组
将pYES2-CcSOS1和pYES2-CdICE1重组质粒同时转化入酵母菌株，培养过程中进行盐胁迫，并观察酵母菌株的生长情况。
结果：
生物信息学分析发现，CcSOS1基因编码的蛋白质序列在亲缘关系较近的物种中具有高度保守性，且在花卉组织中表达量较高。
在酵母转化实验中，CcSOS1靶向pYES2载体并成功转化入酵母菌株。同时，将pYES2-CcSOS1和pYES2-CdICE1同时转化入酵母菌株，观察到盐胁迫对酵母的生长有较大的抑制作用，表明CcSOS1与CdICE1在酵母中同时表达可以增快酵母菌株的恢复速度。
结论：
本研究成功克隆出了切花菊中的SOS1基因，并通过酵母转化和双价基因重组研究了其在盐胁迫响应中的作用。实验结果表明，CcSOS1与CdICE1共同表达可以加速酵母对盐胁迫的恢复速度，说明其在花卉中可能也具有较大的生理意义。同时，本研究也为深入探究花卉植物应对盐胁迫的分子机制奠定了基础。