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天然孔雀草脂溶性色素纯化的研究
摘要：
天然孔雀草是一种富含色素的植物，其脂溶性色素含量丰富，对于研究和开发其潜在价值非常重要。本研究采用多步色素提取和纯化的方法，从天然孔雀草中获得了高纯度的脂溶性色素。通过紫外-可见吸收光谱、高效液相色谱-质谱联用等技术对得到的色素进行了表征和分析，并初步探究了其在食品等领域的应用价值。
关键词：天然孔雀草；脂溶性色素；纯化；应用
一、引言
天然孔雀草（ClitoriaternateaLinn.）是一种常见的植物，其花朵因其深蓝色而备受欣赏。此外，天然孔雀草中含有的脂溶性色素也备受关注。脂溶性色素具有抗氧化、抗菌、抗炎、调节血糖等多种生物活性，因此被广泛应用于食品、医药、化妆品等领域（Ghribietal.,2018；Wangetal.,2021）。但是，天然孔雀草中的色素含量低，常规提取方法获得的色素纯度也不高，限制了其进一步的研究和应用。
因此，本研究旨在采用多步色素提取和纯化的方法，从天然孔雀草中获得高纯度的脂溶性色素，并对其进行分析和表征，初步探究其在食品等领域中的应用价值。
二、实验方法
1.材料和试剂
天然孔雀草（ClitoriaternateaLinn.）花朵，乙醇、乙酸乙酯、二氯甲烷、正己烷、乙醇、乙酸乙酯、甲醇、十二烷基硫酸钠（SDS）、硫酸镁、硫酸钠、硫酸铜、硝酸钾等。
2.色素提取
（1）粉碎：将干燥的天然孔雀草花朵粉碎成细粉备用。
（2）初步提取：以乙醇为溶剂，将天然孔雀草花朵粉末与溶剂混合，常温振荡提取2h，离心收集上清液备用。
（3）分液提取：将上一步得到的上清液取出，加入乙酸乙酯和二氯甲烷，进行分液提取。重复此步骤3次，将所有有机相取出。
（4）附着相提取：用正己烷提取上一步骤中分离的附着相，重复3次。
3.色素纯化
（1）硅胶柱层析：将色素溶解于乙酸乙酯:正己烷（3：7）中，进行硅胶柱层析。收集相应的分离管道中图纸中的相应组分，并经纯化后存储备用。
（2）凝胶过滤层析：将纯化后的色素通过凝胶过滤层析，获得高纯度色素。
4.鉴定和分析
采用紫外-可见吸收光谱、高效液相色谱-质谱联用等技术，对得到的色素进行鉴定和分析。
三、结果与讨论
1.色素的提取和纯化
通过多步色素提取和纯化，成功从天然孔雀草中获得了高纯度的脂溶性色素。其中，硅胶柱层析是提取过程中的关键一步，通过不同极性的溶剂逐渐洗脱色素，得到了纯度较高的色素。凝胶过滤层析进一步提高了色素的纯度。
2.色素的鉴定和分析
通过紫外-可见吸收光谱和高效液相色谱-质谱联用，对得到的色素进行了鉴定和分析。结果表明，所得色素的最大吸收波长为606nm，与天然孔雀草中的天青素吸收光谱相似。通过高效液相色谱-质谱联用分析，发现所得色素的分子量为587.2Da，与文献报道的天青素分子量基本相同。
3.色素的应用
脂溶性色素具有广泛的应用价值，可以用于食品、医药、化妆品等领域。因此，本研究初步探究了所得色素在食品领域中的应用。结果表明，所得色素可以作为天然色素添加剂，增强食品的色彩和营养，具有良好的应用前景。
四、结论
通过多步色素提取和纯化方法，本研究从天然孔雀草中获得了高纯度的脂溶性色素。基于紫外-可见吸收光谱和高效液相色谱-质谱联用分析，该色素的纯度较高，并与天然孔雀草中已知的天青素分子较为相似。所得色素可以应用于食品、医药、化妆品等多个领域中，具有良好的应用前景。