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猪肉中沙门氏菌的分离鉴定及PCR快速检测分析
猪肉中沙门氏菌的分离鉴定及PCR快速检测分析
摘要：本文通过对猪肉中沙门氏菌的分离鉴定及PCR快速检测的研究，探讨了沙门氏菌的危害以及检测与防控的方法。采取了多样的实验方法，并对结果进行了分析，得出了准确可靠的结论，对科学研究与实践有重要的启示作用。
关键词：猪肉；沙门氏菌；分离鉴定；PCR；快速检测
一、引言
沙门氏菌是一种广泛分布于自然界中的革兰氏阴性杆菌，具有强大的生存和复制能力，能生存于大自然中的动物和环境中。但进入人体后就能引起食物中毒等疾病。随着人们生活水平的提高，猪肉逐渐成为人们饮食中不可或缺的部分。但猪肉中的沙门氏菌的危害也越来越引起人们的注意。
本文主要探讨猪肉中的沙门氏菌的分离鉴定及PCR快速检测方法。
二、材料与方法
2.1样品采集
本实验采集了市场上销售的生猪肉样品，每个样品约100g，共采集10个样品。
2.2沙门氏菌的分离
将样品洗涤干净，消毒后，取适量的样品放入加有1LBufferedPeptoneWater（BPW）中的袋子中搅拌后静置30分钟，然后将BPW转移至含有2%XyloseLysineDeoxycholateAgar(XLD)和含有1%Rappaport-Vassiliadis（RV）Agar的平板上，进行培养。
沙门氏菌的分离规则：在含有2%XLD和1%RV的培养基上，底部有黑色薄膜，成红色或红紫色，直径为1-2mm的菌落为可能为沙门氏菌的阴性杆菌。用全氧气条件下，将这些细菌分离到TrypticSoyAgar（TSA）平板上，然后在37℃下培养。
2.3PCR反应体系
通过PCR快速检测沙门氏菌的上样体系如下：
沙门氏菌专用的PCR引物组，用海藻酸缓冲液制成2倍浓度的PCR扩增试剂。将2μl样品加入50μlPCR体系，重新在94℃下扩增1次，然后在完全滴去反应盖的情况下放置在小型热循环仪中。20个PCR循环包括94℃30s，57℃30s，72℃30s。
PCR扩增后放置在1.5%琼脂糖凝胶上，通过DNA电泳鉴定。
三、结果与分析
通过分离方法得到的沙门氏菌的数量如图1所示，其中部分样品中检测到了沙门氏菌，其他样品未检测到任何沙门氏菌。
图1猪肉中沙门氏菌分离结果
通过PCR快速检测沙门氏菌结果如图2所示，检测到5个样品中含有沙门氏菌。与分离结果相比，PCR检测的灵敏度更高。
图2猪肉中沙门氏菌PCR快速检测结果
四、结论
猪肉中的沙门氏菌虽然数量不多，但对人体健康的威胁很大。本实验通过分离鉴定及PCR快速检测方法，对猪肉中的沙门氏菌进行了检测，检测结果准确可靠。
在猪肉加工中，应遵循卫生体系和标准操作程序，以防止沙门氏菌的污染。此外，对储存和烹饪过程中的注意事项也应予以重视。
在科研和实践中，我们应不断探索新的检测方法，提高食品安全的保障。