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SILAC研究蛋白质相互作用SILAC研究蛋白质相互作用1:SILAC定量蛋白质组学原理1.1:SILAC定量蛋白质组学原理1.2.1:培养基准备1.2.2:细胞标记与测试1.2.2:细胞标记与测试1.2.3:实验处理1.2.3:蛋白质分离与质谱分析1.2.4:结果形式2:SILAC研究蛋白质相互作用2.1:SILAC研究蛋白质相互作用原理2.2:SILAC研究蛋白质相互作用特点2.3SILAC研究蛋白质相互作用方法分类2.3.1Pulldown法2.3.2Tag-CoIP法2.3.3常规CoIP法原理: (1)将细胞用“重”型同位素氨基 酸标记,“轻”型细胞用目的目的蛋 白质的siRNA降低目的蛋白质的表达。 (2)等量混合“重”型和“轻”型 细胞的蛋白质,用目的蛋白质的抗体 进行CoIP。 (3)CoIP后的蛋白质进行LC-MS/MS 分析。2.3.4:四种方法比较THANKS!

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