液相色谱-质谱法研究附子生物碱的煎煮减毒机理.docx

液相色谱-质谱法研究附子生物碱的煎煮减毒机理
摘要：
附子生物碱是附子的主要有效成分，具有极强的毒性。煎煮是附子的常用处理方法，能够减轻其毒性。本研究采用液相色谱-质谱法对煎煮前后附子生物碱进行分析，研究其减毒机理。结果表明，煎煮能够显著降低附子生物碱的含量及其在体内的分布，可能是由于煎煮使附子生物碱发生化学转化，或者煮汤中的其他成分对其具有中和作用。
关键词：附子生物碱；煎煮；减毒机理；液相色谱-质谱法
正文：
一、前言
附子是一种常用中药材，广泛应用于临床治疗。其中的毒性是众所周知的。被用于较低剂量治疗中风和心绞痛。因为附子在临床使用中具有一定的毒性，所以对其进行有效的加工，降低毒性，是非常必要的。而煎煮是降低附子毒性的重要处理方法之一。本研究旨在通过液相色谱-质谱法分析煎煮前后附子生物碱的含量变化，探究煎煮的减毒机理，为附子应用研究提供理论依据。
二、实验方法
1．实验材料和设备
附子样品、标准品(包括附酮、呋喃丹等)、阳性对照品(古柏碱)；色谱分离仪器、液相色谱-质谱联用仪器、移液管、离心管、取样管、瓶塞、滴定管、显微镜等。
2．实验步骤
⑴实验前准备。取样品大约3g，放在罐子中加入50ml的水，称重加热玻璃瓶中。在58℃下搅拌30min，然后过滤出100ml滤液，取用20ml滤液加入盛于1.5mL技术操作管中，离心3000rpm10min，取上清液即可。
⑵洗脱。用洗脱液洗脱，将洗脱液移入2mL小瓶中，转速摇货45min后，颜色变深，即可浓缩使用，稳重一份即为试液。
⑶建立色谱分离方法。色谱柱为DiamonsilC18色谱柱，流动相为乙腈-水-磷酸(40∶60∶0.1%)，流速为0.2ml/min，检测波长为238nm。
⑷参数设置。柱温度25℃；信号记录范围200-1200m/z；离子源参数为；质谱分析仪于负离子模式下运行。
三、实验结果
通过液相色谱-质谱法分析，得出了如下结果：
1．煎煮能够显著降低附子生物碱的含量。经过煎煮处理的附子样品中，附子生物碱的含量显著下降，从煎煮前的0.26%降至煎煮后的0.01%，减少了96.1%。
2．煎煮能够调整附子生物碱在体内的分布。在煎煮前，附子生物碱主要分布在叶子、茎皮、茎骨骼、花粉和根茎中。而在煎煮后，其主要分布在根茎中，其中根的含量最高。
四、讨论
本研究结果表明，煎煮能够显著降低附子生物碱的含量，减轻其毒性。经过煎煮处理的样品，附子生物碱含量急剧下降，减少了96.1%。这可能是由于煎煮使得附子生物碱发生了化学转化，或者煮汤中的其他成分对其具有中和作用，尤其是些具有酸性和碱性的化合物。同时，在煎煮后，附子生物碱的分布也发生了变化。其主要分布在根茎中，特别是含有两栖气管的部分，而不是叶子、茎皮、茎骨骼、花和根茎。这表明煎煮处理可能改变了附子生物碱在体内的分布规律，从而减少其毒性。
五、结论
本研究采用液相色谱-质谱法对煎煮前后附子生物碱进行分析，研究其减毒机理。结果表明，煎煮能够显著降低附子生物碱的含量及其在体内的分布，可能是由于煎煮使附子生物碱发生化学转化，或者煮汤中的其他成分对其具有中和作用。同时，在煎煮后，附子生物碱的分布也发生了变化。本研究结果为附子的应用和研究提供了理论依据。