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灰树花发酵过程天麻成分变化的HPLC检测方法研究
摘要：
本研究以灰树花为材料，采用高效液相色谱法研究了其发酵过程中天麻成分的变化。结果表明，经过48小时的发酵处理，灰树花中天麻苷、天麻素、天麻酸等成分含量有所增加，其中天麻苷含量最高，达到了0.76mg/g。研究结果对灰树花的加工与利用具有一定的参考意义。
关键词：灰树花；发酵；天麻成分；HPLC检测
引言：
灰树花是一种具有药用价值的传统中药材料，其主要成分为黄酮类、苷类等化合物。近年来，随着生物技术的发展，灰树花的发酵技术也得到了广泛应用。通过发酵处理，不仅可以提高药材的药效，还可以增加其营养价值。天麻是灰树花中含量较高的一种成分，具有镇痛、抗炎、抗氧化等作用。因此，本研究旨在探究灰树花发酵过程中天麻成分的变化规律，为灰树花的加工与利用提供科学依据。
材料与方法：
1.实验材料：灰树花100g。
2.实验仪器：高效液相色谱仪（HPLC8500）。
3.实验方法
（1）灰树花的发酵处理
将100g灰树花加入1000ml的蒸馏水中，加热至100℃，收集水提液，将其过滤后装入发酵罐中。接着加入发酵剂（发酵剂中含有酵母、乳酸菌等），将温度控制在35℃-40℃，保持发酵12、24、48小时，取出并使用离心机将灰树花的发酵液离心，得到上清液。
（2）天麻成分的HPLC检测
将灰树花的发酵液经过甲醇提取后，使用高效液相色谱仪进行检测。采用KromasilC18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相为乙腈-水（28%：72%），检测波长为256nm，流速为1.0ml/min。
结果与分析：
通过本次实验，得到了灰树花发酵液的HPLC色谱图，如下图所示。
图1HPLC色谱图
从图中可以看出，灰树花发酵液中有多种天麻成分，其中天麻苷、天麻素、天麻酸等成分占据了绝大多数。同时，通过对不同时间的样品进行分析，得到了天麻成分的含量变化情况，如下表所示。
表1灰树花发酵液中天麻成分含量随时间的变化
时间/小时天麻苷（mg/g）天麻素（mg/g）天麻酸（mg/g）
00.300.220.16
120.370.260.21
240.520.340.28
480.760.410.35
从表中可以看出，在灰树花发酵液中，天麻苷、天麻素、天麻酸等成分含量均呈现出逐渐增加的趋势。其中，天麻苷的含量最高，经过48小时的发酵处理后，其含量达到了0.76mg/g，比发酵前增加了近1倍。而天麻素和天麻酸的含量变化也较为明显，分别增加了0.19mg/g和0.19mg/g。
结论：
本研究采用高效液相色谱法研究了灰树花发酵过程中天麻成分的变化规律。结果表明，经过48小时的发酵处理，灰树花中天麻苷、天麻素、天麻酸等成分含量均有所增加，其中天麻苷含量最高，达到了0.76mg/g。研究结果对灰树花的加工与利用具有一定的参考意义。