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2024-12-03
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真菌α-淀粉酶制剂的提纯及保存方法
真菌α-淀粉酶(α-amylase)是一种催化淀粉分解为糖类的酶,具有广泛的应用价值,如在酿造、食品加工、制药等领域。本文将讨论α-淀粉酶制剂的提纯及保存方法。
一、α-淀粉酶的提纯方法
1.活性分配法
该方法利用α-淀粉酶活性的物理化学性质,通过活性分配层析、电泳等技术将其从其它酶中分离出来。该方法操作简单、易于批量生产。
2.薄层层析法
该方法利用α-淀粉酶在不同萃取剂中的分配系数不同的特性,在经过薄层层析分离出有特异性吸附效应的材料上进行吸附-解吸的分离方法。该方法具有分离效果好、分离速度快的优点。
3.亲和层析法
该方法是一种有效的纯化技术,通过构建具有亲和作用的材料,如高羧基化聚乙烯醇、多肽类配体等,使目标酶选择性地吸附在材料表面,并通过洗脱、再生等步骤将酶分离出来。该方法操作简单、具有稳定的纯化效果。
二、α-淀粉酶的保存方法
1.低温冷冻法
该方法是目前最常见的α-淀粉酶保存方法。将酶制剂用磷酸盐缓冲液等适当保护的液体中均匀混合后,置于-80℃的冰箱内冷冻保存即可。该保存方法具有操作简单,能够保持酶制剂在长时间内的活性稳定。
2.稳定性增强法
-添加葡聚糖、多糖等高分子物质,能够增强酶制剂的热稳定性、耐低pH值等应力环境下的稳定性,提高酶分子的抗蛋白酶分解的能力;
-增加酶制剂的蛋白质结构稳定性:将酶制剂放在低水活性介质中,在其中添加一些天然或人造的抗氧化剂,如维生素C、E、B-Cyclocitral,能够有效地减少氧化反应对酶制剂的影响。
3.微生物发酵法
该方法是一种利用微生物代谢产生的一些小分子物质,如麦芽酸、吡咯烷酮等,来保护酶制剂的保存方法。与其它方法相比,微生物发酵法保护酶制剂更加简单,且能够发挥多重作用,如酶保存、活性维护、污染防止等。
结语
本文论述了α-淀粉酶制剂的提纯及保存方法。鉴于α-淀粉酶在许多领域应用广泛,酶制剂的高效纯化及长效稳定性是重要的保障。寻求更加先进、更加实用的技术手段,将对淀粉酶的应用开发成果产生积极影响。
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