SI六C定量蛋白质组学讲解材料-豆柴文库

您所在位置：网站首页 / SI六C定量蛋白质组学讲解材料.ppt / 文档详情

免费试读已结束，剩余 18 页请下载文档后查看

10 金币

下载文档

/ 23

下载提示

如果您无法下载资料，请参考说明：

1、部分资料下载需要金币，请确保您的账户上有足够的金币

2、已购买过的文档，再次下载不重复扣费

3、资料包下载后请先用软件解压，在使用对应软件打开

文本预览

SILAC定量蛋白质组学SILAC定量蛋白质组学1：SILAC定量蛋白质组学原理SILAC法。
1、标记：在缺乏Lys和Arg的培养基中添加Lys和Arg的同位素Lys(D4或13C615N4)、Arg(13C6,或13C615N4)等培养细胞，使蛋白质被标记成“中型”或“重型”；
2、细胞处理，如药物处理；
3、细胞裂解、提取蛋白质；
4、等量混合对照与处理组蛋白质、SDS-PAGE电泳、染色；
5、割取蛋白质条带，胰蛋白酶消化，质谱分析。1.2.1：培养基准备1.2.2：细胞标记与测试1.2.2：细胞标记与测试1.2.3:实验处理1.2.3：蛋白质分离与质谱分析1.2.4：结果形式2:SILAC应用2.1：SILAC定量蛋白质组学实例2.1SchematicforSILAC2.1MSspectrashowingthefourmajorpatternsofphosphorylationobserved.SummaryoffoldchangewithHer2forall462proteins,withseveralindividualproteinshigh-lighted.Proteinswitharatio>1.5(upperredline)areconsideredasincreasedintheirtyrosinephosphorylationlevel,andthosewithratios<0.66(lowerredline)areconsideredasdecreasedintheirtyrosinephosphorylationlevel.
In3T3-Her2cells,198proteinsshowedsignificantincreasesinphosphorylation,and81proteinsshowedasignificantdecrease
辉骏生物：http://www.fitgene.com/免费服务热线：400-699-16632.1Conclusion2.2SILAC研究蛋白质与蛋白质相互作用2.3SILAC研究蛋白质与DNA相互作用2.4SILAC研究蛋白质与RNA相互作用THANKS!