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茚三酮比色法测定CMA馏出物中氨基酸含量的研究
茚三酮比色法测定CMA馏出物中氨基酸含量的研究
引言：
氨基酸是构成蛋白质的基本单位，也是人体重要的营养成分。因此，对氨基酸的检测和分析具有重要的生物医学意义，而氨基酸在检测和分析中又是相对复杂的。茚三酮比色法测定CMA馏出物中氨基酸含量是一种简便、灵敏、可靠的方法。该方法依据氨基酸和茚三酮的环化反应，在酸性条件下，生成稳定的蓝紫色络合物，根据络合物的比色测定，可以准确地测定溶液中的氨基酸浓度。本文详细阐述了该方法的原理、实验操作步骤以及结果分析和讨论。
材料和方法：
1、氨基酸标准品的制备
选用丝氨酸（Ser）作为标准氨基酸，其浓度需在0.01-0.1mg/mL之间。首先用0.05mol/L的氢氧化钠溶液将1.1012g的Ser标准品溶于容量为100mL的量瓶中，用同样的方法制备其他氨基酸标准品溶液。
2、CMA馏出物的制备
取一定量的CMA试剂，溶解在适量的水中，加入酸，调整pH至2-3，加入10%的HEC作为稳定剂后，加入适量的荧光素，制备出CMA馏出物。
3、实验过程
将氨基酸标准品稀释至不同浓度，取每一种浓度的样品各2mL，置于试管中，加入1mL的茚三酮溶液，加入2mL的1mol/L的盐酸溶液，使用洗耳球冲洗试管，混合均匀。
加入苯甲醇1mL，振荡混合，化混合剂的表面。将管子除掉液面以下0.5cm，在其中加入1mL的氢氧化钠溶液，振荡混合。用洗耳球加入约8mL的水，使形成的表面泡沫消失。对于每个样品，立即使用紫外可见分光光度计进行浓度的比色测定，使用1mol/L的盐酸作为空白。
结果和分析：
以Ser为标准品，根据其不同浓度下的比色测定结果，得到它们的吸光度值，绘制了Ser浓度与吸光度之间的标准曲线。根据实验数据和标准曲线，可以计算出CMA馏出物中不同氨基酸的含量。
结果表明，该方法对于CMA馏出物中氨基酸的测定是非常适用的。其测定结果准确，灵敏度高，可重复性好，且样品处理快速，操作简便，省时省力。同时，该方法也可用于测定其他复杂混合物体系中氨基酸的含量。
结论：
茚三酮比色法测定CMA馏出物中氨基酸含量是一种准确、可靠、高效、灵敏的方法，可用于在生物化学、药学、食品科学等领域中对氨基酸含量进行测定和分析。该方法的优点在于其操作简便，结果准确可靠，同时能够快速地处理样品，降低了实验成本和时间，具有很好的应用前景。