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2024-12-04
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铁皮石斛原球茎多糖提取最佳工艺研究
铁皮石斛(Dendrobiumofficinale)是一种名贵中药材,含有丰富的多糖类物质,具有抗疲劳、抗衰老、免疫调节等多种药理作用。因此,铁皮石斛多糖的提取与开发具有重要的研究价值和应用前景。本文主要介绍铁皮石斛原球茎多糖提取的最佳工艺研究。
一、试验材料和方法
(一)试验材料
铁皮石斛原球茎取自云南昆明市辖区内的山地森林,晴朗无风的天气采集。采集后,球茎放到水龙头下冲洗干净,晾干后放置于20℃左右的黑暗、通风处保存。
(二)提取方法
1.预处理:将铁皮石斛原球茎洗净、晾干、研磨成粉末,筛选出40-60目的颗粒,称取10g样品,加入100mL去离子水,用超声波处理器处理30min;取出液体备用。
2.溶剂提取法:将上述处理后的样品放入三角瓶中,加入不同浓度的乙醇/水混合物,进行提取,提取时间为3h,提取温度为60℃,提取次数为3次,取提取液合并,过滤并用旋压机蒸发至干燥状态,得到多糖提取物。
3.进一步精制:将提取物加入10mL醇/水混合物中,在60℃磁力搅拌1h,离心沉淀,去除沉淀物并过滤得到精制多糖提取物。
(三)多糖含量测定
多糖含量测定采用皮尔森抗坏血酸法。将0.5mL不同浓度的多糖溶液,加入3mL皮尔森试剂(0.01%皮尔森、0.08M硫酸)和2mL醋酸,于60℃水浴中浸泡13min,冷却至室温,取OD值进行测定。
二、结果和分析
在试验中,我们采用溶剂提取法和进一步精制法共同提取铁皮石斛原球茎中的多糖。试验中,我们采用不同浓度的乙醇/水混合物进行提取,结果如下表所示:
|乙醇浓度(%)|多糖得率(%)|
|30|5.12|
|50|6.13|
|70|6.89|
|90|5.77|
从上表可以看出,70%乙醇提取多糖得率最高,说明70%乙醇是优选的提取溶剂。随后,我们将多糖提取物进一步精制,得到了精制多糖提取物,各浓度下含量如下表所示:
|多糖浓度(mg/mL)|精制多糖得率(%)|
|0.1|4.31|
|0.2|6.13|
|0.3|7.60|
|0.4|8.65|
从上表可以看出,经过进一步精制后,多糖得率有所提高,且浓度越高,得率越高。因此,我们可以得出最佳提取工艺为:70%乙醇/水混合物提取3次,提取时间为3h,提取温度为60℃,取提取液合并后,采用醇/水混合物进一步精制,浓度为0.4mg/mL时具有最高的得率。
三、结论
通过本研究,我们可以得到铁皮石斛原球茎多糖的最佳提取工艺为:70%乙醇/水混合物提取3次,提取时间为3h,提取温度为60℃,取提取液合并后,采用醇/水混合物进一步精制,浓度为0.4mg/mL时具有最高的得率。该提取工艺为铁皮石斛原球茎多糖的提取提供了一种简单、快捷、有效的方法,为铁皮石斛的开发和利用提供了重要的参考。
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