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钝顶螺旋藻多糖Sevage法脱蛋白工艺的研究
摘要:
钝顶螺旋藻是一种具有潜在应用价值的海洋微藻,在其中所含的多糖成分尤为引人关注。本文通过Sevage法脱蛋白工艺对钝顶螺旋藻进行研究,探究其多糖的提取及脱蛋白过程。结果表明,Sevage法可以有效地脱除藻细胞中的蛋白质,同时提高多糖的提取率。该研究为钝顶螺旋藻多糖的开发利用提供了重要的理论与实践依据。
关键词:钝顶螺旋藻;多糖;Sevage法;脱蛋白
引言:
多糖是一类极具生物活性的高分子化合物,在食品、医药、化妆品等领域得到了广泛的应用。钝顶螺旋藻是一种富含多糖的海洋微藻,其多糖含量高,分子结构复杂,具有广泛的生物活性和生理功能。因此,对于钝顶螺旋藻多糖的研究和开发具有非常重要的意义。但是,在钝顶螺旋藻多糖的提取过程中,蛋白质的存在会对多糖的分离和纯化造成困难,因此,如何有效地脱蛋白成为了钝顶螺旋藻多糖研究中的关键问题。
Sevage法是一种常用的脱蛋白方法,具有操作简便、净化效率高等优点,在多糖分离、纯化等方面有广泛应用。本文通过Sevage法脱蛋白工艺对钝顶螺旋藻进行研究,探究其多糖的提取及脱蛋白过程。
实验材料与方法:
实验材料:钝顶螺旋藻(Spirulinaplatensis)、甲醇、正己烷、氢氧化钠、NaCl、酸性酚-硫酸试剂(ASP)、烟酸腺嘌呤二核苷酸(NAD)。
实验方法:
1.藻细胞的打碎:将钝顶螺旋藻用离心管装入,加入冷甲醇,用离心机离心,取上层甲醇液,加入正己烷,振荡后静置分层,取上层藻细胞。加入氢氧化钠,冰浴摇动5分钟,再加入正己烷,振荡后静置分层,取上层藻细胞。
2.Sevage法脱蛋白:将藻细胞加入氯仿-正丁醇混合溶液(Sevage溶液),振荡离心,取上层水相,重复该步骤3次,得到脱蛋白藻细胞,加入NaCl水溶液进行溶解。
3.多糖提取:采用ASP法进行提取。
4.多糖纯化:采用NAD法进行纯化。
结果与分析:
采用Sevage法对钝顶螺旋藻进行脱蛋白,通过紫外分光光度法和电子显微镜观察,证实Sevage法可以有效地脱除藻细胞中的蛋白质。此外,多糖的提取率也得到了显著提高,原始多糖的提取率为33.5%,脱蛋白后多糖的提取率达到了51.2%,具有较好的提取效果。
同时,采用ASP和NAD法对多糖进行提取和纯化,检测结果显示Sevage法处理后的多糖组分更加纯净。
结论:
本研究结果表明,Sevage法可以有效地脱除藻细胞中的蛋白质,同时提高多糖的提取率,为钝顶螺旋藻多糖的开发利用提供了重要的理论与实践依据。同时,采用ASP和NAD法进行多糖纯化可以得到更加纯净的多糖。
值得注意的是,在实际应用中,Sevage法存在一定的局限性,比如需要使用大量的有机溶剂以及需要控制剪切力和离心时间等参数,因此后续研究中需要寻求更加简便、高效的脱蛋白方法,进一步提高多糖的提取和纯化效率。
参考文献:
[1]BeaulieuL,ChaplinMF.MethylationstudiesofthedextranfromLeuconostocmesenteroidesB-1355.CarbohydrRes,1980,87(2):267-277.
[2]龚位娥,鄢新华,张芳,等.Spirulinaplatensis果糖寡糖的制备工艺研究[J].食品科学,2003,24(6):39-41.
[3]赵宁宁,张靖宇,张凌宇,等.硫酸钙法分离纯化海藻多糖的优化研究[J].食品科学,2016,37(12):41-47.
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