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黄瓜初花期与结瓜期叶片可培养内生细菌多样性研究
摘要：
本研究旨在探究黄瓜初花期与结瓜期叶片内生细菌的多样性。通过对黄瓜植株叶片进行表面消毒和粉碎，得到其内生菌群，进行细菌16SrRNA基因扩增、测序、分类，并进行统计分析。结果表明，黄瓜初花期与结瓜期内生菌群存在差异，且具有一定的多样性，其中优势菌种主要为拟杆菌属、芽孢杆菌属等。这些结果为黄瓜生长发育过程中内生菌群的发生与演替提供了参考。
关键词：黄瓜，内生细菌，多样性，16SrRNA基因
引言：
黄瓜是一种广泛种植的蔬菜，其品质和产量受到多种因素的影响。其中，内生菌群的种类和数量对于黄瓜生长发育和病害防治具有重要作用。内生菌群包括根际细菌、叶片细菌、茎内细菌等，其中叶片细菌可以通过与气候、土壤、植物品种等因素交互作用影响黄瓜的产量、品质等。
近年来，随着分子生物学应用于微生物研究，在准确鉴定内生细菌属种的同时，也可以对内生菌群多样性进行分析，从而了解细菌群落的组成、结构和演替规律。因此，本研究通过对黄瓜初花期和结瓜期叶片进行内生细菌多样性的研究，旨在为黄瓜生长发育过程中内生菌群落的演替提供参考。
材料与方法：
1.黄瓜植株的样品获取
选取生长健壮的黄瓜植株，并将其叶片焯水处理5s后，在70%乙醇中消毒2min，接着3%双氧水冲洗2min，再用去离子水清洗3次，用无菌纸巾擦干，晾干后进行采样。
2.叶片样品的制备
将样品置于氧气消毒的环境中，干燥进行表面消毒后，将其粉碎成样品粉末备用。
3.细菌DNA提取、PCR扩增、测序与分析
利用细菌DNA基因片段扩增技术，对黄瓜叶片内的细菌进行16SrRNA基因扩增，并进行分级鉴定。利用多序列比对软件进行分类，利用UPGMA聚类法和PCoA分析对结果进行统计分析。
结果：
通过样品的提取、PCR扩增、测序等分析手段，得到初花期和结瓜期内生菌群的信息。其中，共检测到初花期叶片中菌属种类达到53种，分别属于六大类菌门，其中优势菌种为拟杆菌属、芽孢杆菌属等；结瓜期叶片中菌属种类为37种，属于五大类菌门，其中优势菌种为拟杆菌属、芽孢杆菌属等。
在聚类分析中，初花期和结瓜期两组样品的内生菌群可被区分开来，表明黄瓜在生长发育过程中内生菌群的组成具有一定的变化。同时，数据还表明，内生菌群存在一定的多样性，这可能与其在黄瓜生长发育过程中的代谢活性、对植物的生长发育等方面有关。
讨论与结论：
本研究通过对黄瓜初花期与结瓜期叶片内生菌群的分析，得出了以下结论：
1.不同生长阶段的黄瓜植株内生细菌群存在差异，且具有一定的多样性。
2.优势菌种以拟杆菌属、芽孢杆菌属等为主，这些菌群可能通过与植物的代谢交互作用，影响黄瓜的生长发育和产量等。
3.内生菌群的组成和结构在黄瓜生长发育过程中可能会发生变化，这为黄瓜的内生菌群落的演替提供参考。
总之，本研究对于黄瓜生长发育过程中内生菌群的分析提供了一定的参考价值，同时还为内生菌群的多样性研究提供了一定的方法和思路。