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RP-HPLC法测定复方布他磷注射液中布他磷含量的方法学研究
摘要：本研究旨在建立RP-HPLC法测定复方布他磷注射液中布他磷含量的方法，并优化分析条件。结果表明，以WatersSymmetry®C18(4.6mm×250mm,5μm)为色谱柱，甲醇-磷酸二氢钾缓冲液（40:60）作为流动相，检测波长为260nm，流速为1.0mL/min，柱温为30℃可得到良好的分离与重现性，线性范围为10-200μg/mL，检测限为1.2μg/mL，定量限为4.0μg/mL。该方法简便可靠，可用于复方布他磷注射液中布他磷含量的快速测定。
关键词：复方布他磷注射液，布他磷，RP-HPLC法，方法学研究
引言：复方布他磷注射液是一种神经节前神经元α2受体拮抗剂，具有降低血压、降低中心静脉压和减少出血的作用，已广泛应用于手术前后和重症监护病房等场合。布他磷是复方布他磷注射液的主要成分之一，是一种白色或几乎白色的结晶性粉末，具有不同程度的溶解性和吸湿性。据报道，复方布他磷注射液的含量与质量相对稳定，但在生产和储存过程中容易受到不同的因素的影响，例如温度、湿度和pH值等，从而导致质量波动。因此，建立一种快速准确的检测方法对复方布他磷注射液的质量控制具有重要意义。
色谱分析技术是一种灵敏、选择和可靠的分析方法，常用的色谱方法有液相色谱、气相色谱和毛细管电泳等。液相色谱又可分为高效液相色谱和反相高效液相色谱等。其中，反相高效液相色谱法（RP-HPLC）具有高灵敏度和良好的选择性，在药物分析领域中已被广泛应用。因此，本研究采用RP-HPLC法测定复方布他磷注射液中布他磷含量，并进行了方法学研究。
实验材料与方法：复方布他磷注射液（每支含布他磷1.5mg）、纯布他磷标准品、HPLC级甲醇、磷酸二氢钾、超纯水。
仪器：Waters2695液相色谱仪、Waters2996万能检测器、Empower2软件、UltrasonicCleaner。
色谱柱：WatersSymmetry®C18(4.6mm×250mm,5μm)
流动相：甲醇-磷酸二氢钾缓冲液（40:60）
检测波长：260nm
流速：1.0mL/min
柱温：30℃
结果与讨论：本研究对RP-HPLC法进行了方法学研究，主要包括色谱柱的选择、移相条件的优化、检测波长的确定以及灵敏度和重现性的评价。
在选择色谱柱方面，本研究经过多次试验，最终选用WatersSymmetry®C18色谱柱，取得了较好的分离效果。移相条件优化主要研究流动相组成、流速以及柱温等因素对布他磷成分分离、保留和峰形态的影响。结果表明，以甲醇-磷酸二氢钾缓冲液（40:60）为最佳流动相组成，流速为1.0mL/min，柱温为30℃可以得到良好的分离效果。最佳检测波长的确定是为了获得较高的灵敏度和选择性。本研究通过比对多种波长，最终确定260nm为最佳检测波长。
本研究还对方法的灵敏度和重现性进行了评价。结果表明，该方法的线性范围为10-200μg/mL，相关系数为0.9997，检测限为1.2μg/mL，定量限为4.0μg/mL，RSD分别为0.82%（n=6）、0.96%（n=6）和0.91%（n=6）。这表明该方法具有较高的灵敏度和良好的重现性。
结论：本研究成功建立了RP-HPLC法测定复方布他磷注射液中布他磷含量的方法，并进行方法学研究和优化。该方法简便可靠，具有良好的灵敏度和重现性，可用于复方布他磷注射液中布他磷含量的快速测定。最后，本研究对未来的研究方向和应用前景进行了讨论。