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PCR-DGGE技术检测速冻饺子馅料中微生物区系
摘要
本研究采用PCR-DGGE技术检测速冻饺子馅料中的微生物区系。通过对不同来源的速冻饺子馅料样品进行PCR扩增和DGGE分析，发现饺子馅料中微生物的种类和数量存在较大差异，其中以肠道类菌群和嗜酸乳杆菌为主要优势菌群。本研究为速冻饺子生产企业制定合理加工工艺和保鲜措施提供了参考依据。
关键词：PCR-DGGE；速冻饺子馅料；微生物区系；肠道类菌群；嗜酸乳杆菌
Introduction
速冻饺子是一种食用方便，受到广泛欢迎的传统食品。由于生产、运输和销售等全过程中温度难以完全控制，速冻饺子馅料中的微生物区系可能会被影响。因此，对速冻饺子馅料中的微生物群落进行检测是非常重要的，可以为保证食品安全、制定合理的生产加工工艺和保鲜措施提供有效的参考。
PCR-DGGE技术是一种基于多样性凝胶电泳的分子生物学技术。该技术可以较为准确地检测微生物的种类和数量，具有操作简便和高通量等优点，在微生物生态学和食品微生物学等领域得到广泛应用。
Materialsandmethods
样品采集
采集了6组速冻饺子馅料样品，包括3组来自不同地区生产厂家的饺子馅料样品和3组生产日期不同的同一品牌饺子馅料样品。所有样品均按照标准工艺进行制备和包装，储存在-20℃的冷冻库中。
DNA提取
样品中的微生物DNA提取操作采用QIAampDNAStoolMiniKit（Qiagen，德国）。
PCR扩增
设计通用细菌引物对27F和1492R（27F：AGAGTTTGATCMTGGCTCAG和1492R：GGYTACCTTGTTACGACTT）进行PCR扩增。
DGGE分析
使用DCode系统进行DGGE分析，使用Polyacrylamidegel电泳法进行分析，设置50-70%的梯度浓度，并以200V运行90分钟。电泳后，采用SilverStain进行染色，图像经扫描并进行分析后，得到多样性分析的图谱。
结果
通过PCR-DGGE技术检测速冻饺子馅料中的微生物区系，发现不同来源的饺子馅料样品中，微生物的数量和种类存在显著差异。对于来自不同地区生产厂家的饺子馅料样品，发现微生物数量较多，种类较为复杂，均具有明显的个体差异。其中，以肠道类菌群和嗜酸乳杆菌为主要优势菌群，分别占总细菌数的50%和30%左右。而对于同一品牌不同生产日期的饺子馅料样品，虽然微生物的数量和种类均有所不同，但是差异不太明显，在微生物区系的群落结构上相对稳定。
Discussion
本研究采用PCR-DGGE技术对速冻饺子馅料中的微生物区系进行了检测。结果表明，在速冻饺子馅料中，微生物的数量和种类存在较大的个体差异，但是相对稳定的群落结构。其中，肠道类菌群和嗜酸乳杆菌的存在可能与速冻饺子馅料中的食物成分和加工工艺有关。此外，不同地区生产厂家的饺子馅料样品中微生物种类和数量的差异也表明，制定合理加工工艺和保鲜措施尤为重要。
Conclusion
本研究使用PCR-DGGE技术对速冻饺子馅料中的微生物区系进行了检测，发现微生物的数量和种类存在个体差异，但是相对稳定的群落结构。肠道类菌群和嗜酸乳杆菌是速冻饺子馅料中主要的优势菌群。结果表明，制定合理的生产加工工艺和保鲜措施对于维护速冻饺子馅料安全和质量是非常重要的。