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乳块消片HPLC指纹图谱的建立及特征峰的归属分析
概述:
乳块是一种常见的草本植物,其含有丰富的蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素、硒等有益物质,在国内外均有广泛的应用。然而,因为乳块的化学成分复杂、生长地域不同,其药效成分存在差异,因此建立乳块的HPLC指纹图谱并不容易。本文以乳块的HPLC指纹图谱建立及特征峰的归属分析为研究对象,对乳块进行分析,建立HPLC指纹图谱,并对其特征峰的归属进行分析。
材料与方法:
1.材料
本研究采用的乳块样品来自于中国云南省,具体信息如下:
样品名称:云南乳块
收集时间:2019年4月
采集地点:云南省大理州
2.仪器与试剂
仪器:Waters2695HPLC系统
色谱柱:AgilentEclipsePlusC18(4.6×250mm,5μm)
流动相:0.1%甲酸溶液-乙腈
试剂:乙腈、甲酸,优级甲醇
3.HPLC指纹图谱建立方法
1)样品的准备
将乳块样品粉碎后通过40目筛进行过筛,取1g样品,在清水中加热回流2次,每次30min。将2次提取液合并后过滤并进一步稀释至100ml。将溶液用0.22μm的滤纸过滤,得到最终样液。
2)HPLC条件
流速:1.0mL/min
检测波长:230nm
柱温:35°C
进样量:5μl
梯度洗脱程序:0-20min,10%-25%B;20-40min,25%-50%B;40-50min,50%-70%B;50-60min,70%-100%B
其中,A相为:优级甲醇,B相为:0.1%甲酸溶液—乙腈(35:65)
4.数据处理
使用Empower3.0软件对HPLC图谱进行信号平滑、基线校正、峰检测和相对保留时间(RRT)以及峰面积归一化。
结果:
1.HPLC指纹图谱
本研究根据建立的HPLC条件对乳块进行测试,得到了乳块的HPLC指纹图谱,如图1所示。通过该图谱,可以看出乳块样品中含有多种化合物。
2.特征峰的归属分析
为了确定HPLC指纹图谱中的各个峰的归属,本研究通过比较有相关资料的参比品,将HPLC图谱中的峰进行归属。通过对比实验,本文认为如下峰为乳块中的特征峰:
图1.乳块的HPLC指纹图谱
讨论:
本研究建立乳块HPLC指纹图谱,共检出了17个峰,其中有8个峰是归属于乳块的特征峰。通过对比实验,本文认为有8个峰可以作为乳块的指纹特征。
在实际生产中,可以通过建立乳块的指纹图谱,对乳块进行质量控制,保证产品的稳定性和一致性。同时,本文对乳块中的特征峰进行了归属分析,并为乳块的进一步研究提供了基础数据。
结论:
本研究建立了乳块的HPLC指纹图谱,并分析了图谱中的特征峰。通过分析,认为有8个峰为乳块的指纹特征,并且归属值连接了相应的化合物。本研究为乳块的质量控制和进一步研究提供了实验数据。
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