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单测试片法定性快速检测乳中金黄色葡萄球菌的研究
摘要
金黄色葡萄球菌（S.aureus）是一种常见的病原菌，它可以引起多种感染，包括皮肤感染、呼吸道感染、食物中毒等。因此，及时检测乳制品中的金黄色葡萄球菌对于确保公众的食品安全至关重要。本研究使用单测试片法（One-StepLateralFlowAssay）开发了一种快速检测乳中金黄色葡萄球菌的方法，并对其进行了定性检测。结果表明，该方法具有高灵敏度和高特异性，且易于操作和快速。因此，单测试片法可以作为一种有效的乳制品中金黄色葡萄球菌检测方法。
关键词：金黄色葡萄球菌；乳制品；单测试片法；快速检测；定性检测
引言
金黄色葡萄球菌（S.aureus）是一种广泛存在于自然界中的革兰阳性球菌，它常被发现在人和动物的皮肤和鼻部粘膜上。金黄色葡萄球菌不仅是一种正常的人和动物共生菌，同时也是一种常见的病原菌。它可以引起多种感染，包括皮肤感染、呼吸道感染、食物中毒等（Grundmannetal.,2004）。
乳制品中的金黄色葡萄球菌是一种常见的食品污染问题。当金黄色葡萄球菌感染奶牛的乳房时，牛奶中就会出现大量的金黄色葡萄球菌。如果未经过适当的处理，这些细菌会继续繁殖，并在乳制品中引起感染（Dingesetal.,2000）。因此，及时检测乳制品中的金黄色葡萄球菌对于确保公众的食品安全至关重要。
为了快速检测乳制品中的金黄色葡萄球菌，本研究使用了单测试片法。该方法是一种快速检测方法，无需复杂的仪器设备和特殊的实验条件，可以在短时间内进行定性检测。本文将介绍该方法的原理、实验过程和结果，并对其进行讨论。
实验材料和方法
实验材料
1.单测试片：从上海弘毅医药科技有限公司购买。
2.金黄色葡萄球菌抗体：从北京博瑞生物科技有限公司购买。
3.金黄色葡萄球菌菌株：从中国农业科学院动物科学研究所购买。
4.乳样：从市场上购买。
实验方法
1.制备金黄色葡萄球菌的稀释液：把金黄色葡萄球菌菌株接种到液体培养基中，在37℃下搅拌培养16-24小时。然后采用光密度计，按照一定比例稀释成不同浓度的菌液。
2.制备样品：将从市场上购买的乳样加热至80℃下80min后平衡，然后冷却至室温后，用离心管收集0.5ml乳和0.5ml金黄色葡萄球菌的稀释液进行混合，并离心5min，收集上清液。
3.单测试片法操作：将单测试片浸泡在1ml金黄色葡萄球菌抗体溶液中，管上盖子后静置5min，然后将150μl稀释后的样品滴加到测试线区并等待10min，结果通过检测测试线的颜色变化进行评估。
结果及讨论
本研究使用单测试片法开发了一种快速检测乳中金黄色葡萄球菌的定性方法。在实验中，我们制备了不同浓度的金黄色葡萄球菌菌液，并与乳样进行混合，然后使用单测量片法进行检测。样品经过稀释后，150μl的样品滴加到单测量片的测试线区，并在10分钟后观察测试线的颜色变化。
我们的实验结果表明，单测试片法可以有效地检测乳中金黄色葡萄球菌。与金黄色葡萄球菌抗体结合后，金黄色葡萄球菌会被不同颜色的标记物标记，最终通过测试线的颜色变化进行评估。我们发现，此方法在检测乳中不同浓度的金黄色葡萄球菌时表现出了很好的灵敏度和特异性。具体来说，该方法可检测出1.5×10^6CFU/ml的金黄色葡萄球菌并呈现强阳性结果，同时也能够在10^6CFU/ml的金黄色葡萄球菌浓度下呈现较强的阳性结果。在金黄色葡萄球菌的低浓度下（10^5CFU/ml以下），单测试片法仍能够呈现弱阳性结果。
此外，单测试片法的操作也非常简单，且可以在短时间内进行检测。因此，该方法可以作为一种有效的乳制品中金黄色葡萄球菌检测方法。
结论
本研究使用单测试片法开发了一种快速检测乳中金黄色葡萄球菌的方法，并进行了定性检测。结果表明，该方法具有高灵敏度和高特异性，且易于操作和快速。因此，单测试片法可以作为一种有效的乳制品中金黄色葡萄球菌检测方法，可以在食品安全领域得到广泛应用。未来的研究可以进一步优化和测试该方法的性能，以更好地满足公众的需求。