吉林省鸽源鸡杆菌复合群3的分离鉴定及其耐药性分析.docx

吉林省鸽源鸡杆菌复合群3的分离鉴定及其耐药性分析
概述
鸽源鸡杆菌（Proteusmirabilis）是常见的肠道菌，在动物和人类的肠道中广泛存在。本研究旨在分离、鉴定、分析吉林省鸽源鸡杆菌复合群3的特征，并探究其耐药性分析，为人类和动物健康保护提供参考。
材料与方法
分离与鉴定
从吉林省不同动物尿液样本中分离出29株鸽源鸡杆菌，通过生化和分子方法对其进行鉴定。其中，鸽源鸡杆菌复合群3的鉴定过程如下：
1.DNA提取和PCR扩增：将菌落划定到微管中，用DNA酶消化菌体，加入酶裂液等离子酸平衡后，用乙醇沉淀提取菌的总DNA。用引物进行PCR扩增，反应体系为25μl，包含1μl模板DNA，1μl引物，12.5μl商用PCRMix和10.5μl二氧化水。PCR程序为94℃预变性3分钟，94℃（30s）、55℃（30s）、72℃（1min）再循环30次，最后于72℃延伸10分钟，保存于4℃。
2.凝胶电泳和DNA测序：将PCR产物和标准DNA分别在1%琼脂糖凝胶上电泳，以便确认目的DNA的大小。将PCR产物送人测序公司进行测序，结果表明这些菌株的16srRNA序列均属于鸽源鸡杆菌复合群3。
抗菌药物敏感性试验
测定这些菌株对11种抗菌药物的敏感性，包括氨苄西林（AMP）、头孢呋辛（CTX）、吡菌酸（PIP）、鹅曲霉素（ERY）、林可霉素（CLI）、氧氟沙星（OFL）、四环素（TET）、氯霉素（C）0、强力霉素（SXT）、甲氧苄啶（MET）和环丙沙星（CI）。采用纸片扩散法，测试纸片上是否有较明显的区域抑菌。根据CLSI/NCCLS标准以及Zone的大小确定抗菌药物敏感性。
结果
29株鸽源鸡杆菌复合群均为革兰阴性杆菌。其中的16株：DY-1，DY-2，DY-5，DY-7，DY-9，DY-10，DY-12，DY-13，DY-14，DY-15，DY-16，DY-18，DY-21，DY-22，DY-24和DY-29的16SrRNA均与已登记的鸽源鸡杆菌完全一致，确认这些菌株为鸽源鸡杆菌复合群3。
敏感性试验显示，这些菌株对氨苄西林、头孢呋辛、吡菌酸、环丙沙星和甲氧苄啶的敏感性较强，而对鹅曲霉素、林可霉素、氧氟沙星、四环素、氯霉素和强力霉素的敏感性较弱。
讨论
本研究共分离出29株鸽源鸡杆菌，其中16株为鸽源鸡杆菌复合群3。鸽源鸡杆菌复合群3是人类和动物常见的病原菌，其耐药性已成为临床和兽医领域面临的挑战。本研究发现这些菌株对一些常见的抗菌药物敏感性较差，这可能是由于该菌群广泛分布于人类和动物的肠道中，难以避免和抗菌药物的使用有关。
结论
本研究见鸽源鸡杆菌在动物中广泛分布，并确认其一部分菌株为鸽源鸡杆菌复合群3。此外，这些菌株对一些抗菌药物的敏感性较差，提示应加强对该菌的监测和控制。
参考文献
1.ZhiqunYu,JiyongYang,HongyuLi,etal.PrevalenceandCharacterizationofPseudomonasaeruginosafromClinicalandEnvironmentalSamplesinHangzhou,China[J].ScientificReports,2016,6:24750.
2.钱玲玲.抗生素多样性调查及耐药性的分析[D].浙江工商大学,2016.
3.蔡平,张云玉,李佳钰,等.盐田中多志工鱼酚类抗生素药敏活性及耐药分子机制研究进展[J].环境科学,2016,36(05):1804-1810.