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大肠菌群测量审核结果与分析
论文题目:大肠菌群测量审核结果与分析
摘要:
大肠菌群是我们肠道中最重要的细菌族群之一。对于人类的健康具有极其重要的作用。因此,定量评测肠道中大肠菌群的多寡和种类对于人类健康的研究具有意义。本文介绍了大肠菌群定量评测常用的方法,并着重介绍了现场测量方法。此外,本文对于大肠菌群测量结果进行了审核,并对于常见异常情况进行了分析。
关键词:大肠菌群、评测、结果审核、异常情况
一、介绍
大肠菌群在人类肠道中占据着非常重要的位置,它们具有非常重要的代谢功能,例如:可以消耗肠内残留物,促进消化道蠕动,合成各种维生素和激素等等。因此,大肠菌群的多寡和种类常常被视为反映人体健康的标志之一。目前几种评估大肠菌群多寡和种类的方法有:定量PCR法、16SrRNA基因测序、FISH法等等。本文将着重介绍现场测量法。
二、现场测量法
现场测量法通常使用DNA芯片芯片或者MassARRAY等技术,其优点在于速度快、简便易行。现场测量法的主要步骤如下:
1.样品采集
目前,采集人体肠道样品的方法主要有三种:肠道灌流、肠道组织样品采集和粪便样品采集。其中,肠道灌流法和肠道组织采集法具有创伤性强、样品数量少等缺点,而粪便样品采集法简单、非侵入性对于实现大规模人群测量具有明显优势。
2.粪便样品提取DNA
粪便样品提取DNA是一项非常关键的步骤,因为稳定的DNA可以提高PCR的灵敏度、可靠性和特异性。目前粪便样品DNA提取技术主要有单步法和多步法两种。其中,多步法具有更高的稳定性,但是需要更长的时间和更复杂的步骤。
3.大肠菌群评价
在大肠菌群评价中,定量PCR法被广泛应用。其具有速度快、结果准确等优点,已经成为常用的方法之一。同时,近年来基于DNA芯片或MassARRAY的现场测量法也已经逐渐成熟,可以实现对于多种微生物种类的测量和评估。
三、大肠菌群测量结果审核
在大肠菌群测量过程中,常常会出现一些误差和异常情况,例如:样品污染、PCR失效等。因此,对于测量结果进行审核是非常重要的。
1.样品污染
样品污染是一个非常常见而又不易察觉的问题。对于大肠菌群检测过程中存在样品污染的情况,容易导致严重的测量误差。因此,我们需要注意样品提取过程中使用高质量的纯化试剂和实验室卫生等方面的卫生条件。
2.PCR失效
PCR失效是一个痛点问题,其直接影响PCR检测的准确性。因此,我们需要在样品提取、PCR制备和检测过程中严格注意各个环节的控制,特别是PCR反应组成的荧光标记和引物的质量保证。
3.检测结果异常
常见的检测结果异常包括:个别样本异常、样本筛选误差和脱靶、阳性或阴性样本过少等情况。针对这些异常结果,我们需要及时审查原始数据,排除干扰因素,重新测量或重新分析。
四、结论
大肠菌群测量的稳定性和准确性对于人体健康的研究具有极其重要的意义。本文介绍了现场测量法常用的方法,以及对于测量结果进行审核的相关分析,希望能够为大肠菌群测量以及相关研究提供参考。
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