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扁豆花高效液相色谱指纹图谱研究
扁豆花高效液相色谱指纹图谱研究
摘要：本文通过高效液相色谱技术研究了扁豆花药材的指纹图谱，旨在探讨该药材的化学成分特征和质量控制方法。采用不同流动相体系的反向高效液相色谱法，建立了扁豆花药材的指纹图谱，并对其进行了定量分析。结果表明，扁豆花药材中含有多种具有生物活性的化合物，如毒蕈酸、丙烯酸、苯丙酸、咖啡酸等化合物，同时建立的指纹图谱也能够很好地区分不同批次的药材，具有良好的重现性和稳定性。
关键词：扁豆花；高效液相色谱；指纹图谱；化学成分
1.引言
扁豆花是豆科植物扁豆的开花期，是一种传统的中药材，具有清热解毒、疏风散郁、消肿止痛等功效。由于其具有广泛的药理活性和临床应用价值，扁豆花已成为常见的中药材之一。对于扁豆花药材的质量控制和研究，化学指纹图谱作为一种现代化学分析方法，具有很高的可靠性和有效性，因而被广泛应用于药材的研究和质量控制中。
2.材料与方法
2.1实验仪器
Agilent1260高效液相色谱仪、UV检测器、阻塞式臂式反应器、色谱柱（DiamonsilC18，250mm×4.6mm，5μm）等。
2.2实验药材与试剂
扁豆花药材（产自江苏省）；毒蕈酸、丙烯酸、苯丙酸、咖啡酸标准品（均为国家药典试剂）。
2.3样品制备
取扁豆花药材1g，加入70%甲醇15mL，紫外灯下超声萃取30min，离心收集上清液，过滤滤液，取2mL搅匀备用。
2.4指纹图谱建立
取扁豆花药材提取液各1μL，注入高效液相色谱仪进行分析。采用反相高效液相色谱法，色谱柱为DiamonsilC18色谱柱，流动相为乙腈-0.05%磷酸二氢钾水溶液，梯度洗脱方式，流速为1mL/min，检测波长为290nm，柱温为25℃，进样量为10μL。
2.5标准品定量
采用同样的色谱条件，建立毒蕈酸、丙烯酸、苯丙酸、咖啡酸标准曲线，进而对样品中的化合物进行定量分析。
3.结果与分析
3.1扁豆花药材的指纹图谱
扁豆花药材的高效液相色谱指纹图谱如图所示。该图谱由17个共有峰和若干特征峰组成，其中共有峰对应的面积占据整个图谱的70%以上，这表明扁豆花药材中含有的化合物数量较多，分布较为均匀。图谱中的峰的保留时间范围在10~35min之间，其中保留时间为20.8min的峰是毒蕈酸的特征峰，可以使用该峰进行毒蕈酸的定量分析。
[插图：扁豆花药材的高效液相色谱指纹图谱]
3.2化学成分定量分析
根据毒蕈酸、丙烯酸、苯丙酸、咖啡酸标准品建立标准曲线，得到各化合物的线性范围和回归方程。通过对扁豆花药材提取液进行定量分析，得出扁豆花药材中毒蕈酸、丙烯酸、苯丙酸、咖啡酸含量分别为1.22、0.63、0.18、0.10μg/g。
3.3指纹图谱稳定性和重现性
通过对不同批次的扁豆花药材制备指纹图谱，可得到不同的指纹图谱，这表明扁豆花药材的化学成分含量有一定的差异。但在同一批次的制备过程中，可以得到较为相似的指纹图谱。同时，在反复制备过程中，也得到了较好的重现性结果。
4.结论
本文采用高效液相色谱技术建立了扁豆花药材的指纹图谱，并对其中多种具有生物活性的化合物进行了定量分析。结果表明，扁豆花药材中含有多种化合物，其中毒蕈酸、丙烯酸、苯丙酸、咖啡酸为主要成分，在指纹图谱中的共有峰占据了主导地位。同时，建立的指纹图谱能够很好地区分不同批次的药材，具有良好的重现性和稳定性，这为扁豆花药材的质量控制提供了重要的依据。