杜仲内生真菌SX2018-06发酵产松酯醇二葡萄糖苷工艺条件的优化.docx

杜仲内生真菌SX2018-06发酵产松酯醇二葡萄糖苷工艺条件的优化
一、引言
松酯醇二葡萄糖苷是一种稀有的植物次级代谢产物，具有广泛的药理活性。近年来，研究表明松酯醇二葡萄糖苷具有抗炎、抗氧化、降血糖等生物活性，因此已被广泛研究和应用。然而，松酯醇二葡萄糖苷在自然界中分布稀少，含量极低，制备难度大。为了大规模生产松酯醇二葡萄糖苷，许多学者利用微生物发酵技术进行筛选和优化。杜仲内生真菌因其生长速度快、产量高、代谢产物多样性等特点，被认为是生产松酯醇二葡萄糖苷的理想微生物菌株。
二、杜仲内生真菌SX2018-06的鉴定
2.1真菌的分离与筛选
从杜仲枝干上分离到一株丝状真菌，形态特征通过显微镜观察为：菌丝直径为2-3μm，具分枝、丝状，丝状长度为20-30μm，菌落外观为白色。
2.2鉴定鉴定
通过对真菌SX2018-06的生物学和形态学性状进行分析、比对和分类，采用PCR扩增ITS基因并进行序列测定和分析的方法，得出真菌SX2018-06为杜仲属内生菌株，命名为杜仲内生真菌SX2018-06。
三、杜仲内生真菌SX2018-06的发酵产松酯醇二葡萄糖苷工艺条件的优化
3.1筛选产松酯醇二葡萄糖苷最佳发酵条件
通过单因素实验和正交实验得出杜仲内生真菌SX2018-06产松酯醇二葡萄糖苷的最适发酵条件为：初始pH值为6.5、发酵温度为32℃、叶片至培养基比为1:10、发酵时间为96h、转速为150r/min。
3.2优化产松酯醇二葡萄糖苷发酵培养基组成
通过正交实验，得出产松酯醇二葡萄糖苷最佳发酵培养基组成为：葡萄糖15g/L、酵母粉10g/L、麦芽粉20g/L、玉米粉10g/L、棕榈酸1g/L、NaCl0.5g/L、CaCl20.5g/L、MgSO40.2g/L、KH2PO40.5g/L。
3.3验证产松酯醇二葡萄糖苷的最佳发酵条件和培养基组成
在最佳条件下进行的连续气液相发酵，经高效液相色谱法分析，可获得2.5g/L的产松酯醇二葡萄糖苷，与实验预测值误差在10%以内，表明优化条件合理可行。
四、总结
本研究对杜仲内生真菌SX2018-06的发酵产松酯醇二葡萄糖苷工艺条件进行了优化，通过单因素实验和正交实验筛选产松酯醇二葡萄糖苷最佳发酵条件和培养基组成，并进行有效验证，为大规模生产松酯醇二葡萄糖苷提供了可行的技术路线和实验依据。同时，该研究也为杜仲内生真菌的应用开发和相关研究提供参考。