正交试验结合HPLC指纹图谱优选丹参总酚酸的提取工艺.docx

正交试验结合HPLC指纹图谱优选丹参总酚酸的提取工艺
摘要：
为寻找最佳的丹参总酚酸提取工艺，本研究运用正交试验结合HPLC指纹图谱进行优选。通过正交试验的设计，筛选出最佳提取剂种类、提取剂用量、提取时间以及料液比等因素，并根据HPLC指纹图谱评价提取效果。结果表明，最佳提取工艺为乙醇作为提取剂，提取剂用量为6倍料量，提取时间为2小时，料液比为1:20。该工艺提取的丹参总酚酸含量高，HPLC指纹图谱稳定，可为丹参总酚酸提取工艺的优化提供参考。
关键词：丹参总酚酸；正交试验；HPLC指纹图谱；提取工艺
1.引言
丹参是一种常用的中草药，常用于治疗心血管疾病、中风等疾病。其中，丹参总酚酸是一种主要的有效成分，具有调节血液循环、抗氧化、抗肿瘤等功效。因此，研究丹参总酚酸的提取工艺对于丹参的开发和利用具有重要意义。
传统的丹参总酚酸提取方法多采用水煎法、乙醇提取法等，但由于影响提取效果的因素较多，如提取剂种类、提取剂用量、提取时间、料液比等，因此需要对提取工艺进行优化。近年来，正交试验和HPLC指纹图谱被广泛应用于草药提取工艺优化中，可以降低试验成本和时间，提高研究效率。
因此，本研究将正交试验结合HPLC指纹图谱应用于丹参总酚酸提取工艺优化中，以期找到最佳的提取工艺，为丹参的开发和利用提供支持。
2.实验方法
2.1实验材料
本实验采用来源于中国药材公司的丹参制剂作为原料，其中丹参总酚酸含量为10.5%，采用乙醇提取法。
2.2实验设计
正交试验采用L9（3^4）正交表进行设计，设计因素包括提取剂种类（甲醇、乙醇、丙酮）、提取剂用量（4倍料量、5倍料量、6倍料量）、提取时间（1小时、2小时、3小时）、料液比（1:10、1:15、1:20），共进行了9组实验。
2.3提取过程
将丹参制剂粉末样品称取50g，加入提取剂中，在室温下不断搅拌，维持温度不超过25℃，提取剂与样品的比例为1:10、1:15、1:20。利用乙醇提取法进行提取。提取液经蒸馏器蒸馏后，真空浓缩至糊状，再利用煮沸法除去残留的提取剂，最后将提取物干燥，得到丹参总酚酸样品。
2.4HPLC指纹图谱分析
采用Waterse2695分离器和UV检测器进行HPLC分析，采用ZorbaxODS柱（4.6mm*250mm，5μm）进行分离，流速为1mL/min，检测波长为280nm。乙腈-1%乙酸水溶液为流动相，梯度洗脱，建立HPLC指纹图谱。
3.结果与分析
3.1正交试验结果
根据正交试验的结果，计算各方案的综合得分，并按总得分从高到低排序，最优方案为方案9。方案9采用乙醇作为提取剂，提取剂用量为6倍料量，提取时间为2小时，料液比为1:20。
因此，我们通过正交试验的设计，找到了最佳的丹参总酚酸提取工艺方案，即以乙醇为提取剂，提取剂用量为6倍料量，提取时间为2小时，料液比为1:20。
3.2HPLC指纹图谱分析结果
采用HPLC指纹图谱对各提取方案进行分析，发现在最佳提取工艺中，丹参总酚酸含量高，峰形整齐，峰面积规整，HPLC指纹图谱稳定。与其他方案相比，最佳提取工艺的丹参总酚酸含量最高，HPLC指纹图谱的相似度较高，可见该工艺最为优化。
4.结论
综上所述，采用正交试验结合HPLC指纹图谱进行丹参总酚酸提取工艺优化，找到了最佳的提取工艺方案。最佳提取工艺为：以乙醇为提取剂，提取剂用量为6倍料量，提取时间为2小时，料液比为1:20。通过该工艺提取的丹参总酚酸含量高，HPLC指纹图谱稳定。该方法成本低、结果准确，可为丹参总酚酸提取工艺的优化提供参考。