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番茄皮中番茄红素含量测定方法
植物色素是植物体内的一类天然化合物,其具有丰富的营养和保健功能。其中,番茄红素是一种强效的抗氧化剂,具有优秀的抗癌、抗氧化、抗衰老、调节免疫系统等功效,在实际生产和市场销售中备受青睐。因此,对于番茄红素含量的测定方法具有重要意义。本文将介绍番茄皮中番茄红素含量测定方法。
一、概述
番茄红素是一种天然的类胡萝卜素,其化学结构与β-胡萝卜素类似。但相比之下,番茄红素具有更强的抗氧化性质和生物活性。多项研究表明,番茄红素具有良好的保健功能,如预防心脑血管疾病、调节免疫系统、抗氧化、抗癌等。因此,番茄红素的存在与含量成为研究人员的关注焦点。
二、番茄皮中番茄红素提取
番茄皮中含有丰富的番茄红素,而其提取方法对于测定番茄红素含量至关重要。以下是一种简单易行的提取方法。
(一)实验仪器设备和试剂
仪器设备:离心机、磁力搅拌器、恒温水浴、分液漏斗、过滤器、紫外分光光度计等。
试剂:丙酮、对苯二酚、氯仿、无水硫酸钠、纯水等。
(二)实验步骤
1.取番茄皮样品,切成小片,称取1g左右的样品,加入10mL的丙酮中,用磁力搅拌器低速搅拌30min。
2.离心,将上清液转移到另一个离心管中。
3.重复以上操作2次,将三次上清液合并,进行脱色。
4.在离心管中加入等量的对苯二酚,混合均匀。
5.加入等量的氯仿,混合均匀,静置分层。
6.取出下层氯仿层,加入一定量的无水硫酸钠,得到含番茄红素的溶液。
三、番茄红素含量的测定
在获得含番茄红素的溶液后,如何准确地测定其含量则成为一项关键性任务。本文将介绍两种测定方法。
(一)分光光度法
分光光度法利用番茄红素在紫外波长(446nm)下的吸收特性,测定其含量。
实验步骤:
1.准备番茄红素的标准曲线,将番茄红素以不同浓度加入一定量的溶液中,并在446nm处测定吸光度。
2.取番茄皮提取液,过滤,调整至合适的浓度后,利用分光光度计在446nm处测定吸光度。
3.根据标准曲线,计算番茄红素的含量。
(二)高效液相色谱法
高效液相色谱法(HPLC)是目前广泛采用的测定番茄红素含量的方法。
实验步骤:
1.准备番茄红素的标准曲线,将番茄红素以不同浓度加入一定量的溶液中,利用HPLC测定番茄红素的峰高和峰面积。
2.取番茄皮提取液,并根据需要使用经过硅胶柱分离纯化的液相。
3.采用反相HPLC法,用导体检测器测定番茄红素峰高或峰面积。
4.根据标准曲线,计算番茄红素的含量。
四、结论
通过以上实验步骤,可以快速、便捷、准确地测定番茄皮中番茄红素的含量。这对于优化番茄生产、研究番茄红素的保健作用具有重要意义。
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