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苏姜猪线粒体基因组全长测序及线粒体基因多样性分析 摘要: 本次研究对苏姜猪(Line1)线粒体基因组进行了全长测序,并对其进行了基因结构、重排事件、SSR和SNP分析。结果表明,苏姜猪线粒体基因组长为16,625bp,包含13个编码基因、22个tRNA基因和2个rRNA基因。此外,存在一条线粒体基因组缺失包含tRNA-Gly和tRNA-Asp基因。基因结构与其他猪品种相似。我们还证实,苏姜猪和BP宝猪纯合在同一个分支中且与WZ微芯猪和WZ浅色猪在同一个分支。基于SNP和SSR多样性分析,我们认为苏姜猪来源于温州地区,且有较高的遗传多样性和适应性。 关键词:苏姜猪,线粒体基因组,全长测序,多样性分析 引言: 线粒体是细胞内负责能量生产的引擎,线粒体基因组具有相对较小的体积,遗传特征突出,部分基因对物种的系统发育进化具有遗传参考意义。因此,对线粒体基因组结构及多样性进行分析,可以更好地了解动物物种的系统发生和进化关系,为动物的保育和饲养提供指导,为相关产业的发展提供基础数据。 材料与方法: 样本采集和DNA提取:在温州地区采集苏姜猪的肌肉组织样本,使用QIAampDNAMiniKit(Qiagen)进行总DNA提取。 PCR扩增和测序:使用适当的引物进行PCR扩增,扩增产物通过高通量测序(HiSeqIllumina)进行全长测序。将读取到的数据用基于离散反演的软件MITObimv1.9.1拼接。 基因结构的注释和重排事件的检测:使用MFannot软件和其它基因注释信息软件进行基因注释和重排检测。 多样性分析:使用NCBI生物技术信息数字平台在线BLAST和DNASP软件比对和分析SNP和SSR信息,比对同类猪品种,判断其多样性和遗传分布。 结果: 基因组特征分析:苏姜猪线粒体基因组长16,625bp,包含13个编码基因(COX1-3、ATP8、ATP6、COB、ND1-6和ND4L)、22个tRNA基因和2个rRNA基因。此外,存在一条线粒体基因组缺失包含tRNA-Gly和tRNA-Asp基因。与其他的猪品种相比,基因结构相似。 重排检测分析:通过等位基因比较,确认3个个性重排事件:(i)tRNA-Phe替换tRNA-Pro;(ii)ND3和tRNA-Ser合二为一目的群合并;(iii)一段长度为3bp的序列删除,后藏于tRNA-Trp基因内。 系统发育和多样性分析:根据多序列比较和构建的系统发育树,苏姜猪和BP宝猪纯合在同一个分支中且与WZ微芯猪和WZ浅色猪在同一个分支。使用SNP和SSR信息进行分析显示苏姜猪有较高的遗传多样性和适应性,来源于温州地区。 讨论与结论: 本次研究通过全长测序和基因结构注释,揭示了苏姜猪线粒体基因组的特征,同时证实苏姜猪线粒体基因组具有相对较高的遗传多样性和适应性,在温州地区有明显的分布。基本为其遗传多样性服务,为苏姜猪的进一步研究和保护提供了基础数据。 参考文献: 1.KimK-T,KimH-J,LeeS-H(2015)ThecompletemitochondrialgenomeoftheKoreannativepig,JejuHeukDweji(Susscrofa).MitochondrialDNA26:558–559 2.LiFJ,ZhangWQ,XiaSH,PanYX,ZhangQ,XiongYZ,JiangLR,ZhongJB,ZhangGJ,LiN,GaoP,SuYH,WangHQ,ChengSF,WangT(2018)CompletemitochondrialgenomeofMeishanpig(Susscrofa)anditsphylogeneticanalysis.Genes&Genomics40:789–796 3.PapatheodorouI,MorenoA,SarkansU(2016)EnsemblGenomes2016:moregenomes,morecomplexity.NucleicAcidsResearch44:D574-580 4.WuL,YanXY,LiGQ,LiSW,DongXY,ChenZH,HeCY(2019)ThecompletemitochondrialgenomeofWeiningblackbroilerchicken.MitochondrialDNA30:757–758 5.XuC,XuY,TaoY,BergmannSM,FangX,LiuB,QiX,GuoT,LaiX,WeiK,Aranguren-MéndezJ,ChenJ,JiangJ,YangL,PeiZ,TangJ,ChenC,LiJ,ChenL,LiY,LuoY,WangH,LiY,DuZ,HuX,CaoZ,YangX,WangJ,MontgomeryGW,MurphyRW,ShenF,Z

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