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高产α-半乳糖苷酶菌株的筛选鉴定及发酵培养基的优化
摘要:本研究以土壤样品为主要来源,筛选出一株高产α-半乳糖苷酶的菌株,并对其进行鉴定。同时,对该菌株在不同发酵培养基下的生长特性和产酶能力进行了研究及优化,得出最佳的发酵培养基配方。
关键词:α-半乳糖苷酶;菌株筛选鉴定;发酵培养基优化
1.引言
α-半乳糖苷酶是一种广泛存在于微生物中的酶,其主要作用是水解α-半乳糖苷键,将其分解成葡萄糖和乳糖。α-半乳糖苷酶在食品、制浆造纸、医药等领域都有着重要的应用价值,因此,寻找高产α-半乳糖苷酶的菌株以及优化发酵过程极为重要。
2.材料和方法
2.1菌株的筛选和鉴定
本研究选取土壤样品为主要来源,通过稀释涂板法筛选出高产α-半乳糖苷酶的菌株,并利用生化鉴定和16SrDNA序列分析对其进行鉴定。
2.2发酵培养基的优化
本研究利用单因素实验和正交试验,优化了发酵培养基的配方,并选取最佳的培养基进行发酵研究。
2.3酶活力的测定
本研究利用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法对α-半乳糖苷酶的酶活力进行了测定。
3.结果
3.1菌株的筛选和鉴定
经稀释涂板法筛选,本研究从土壤样品中分离到了一株高产α-半乳糖苷酶的菌株,经过生化鉴定及16SrDNA序列分析,确定该菌株属于居里杆菌属。
3.2发酵培养基的优化
通过单因素实验和正交试验,本研究确定了最佳的培养基配方,包括:麦芽糊精10g/L、酵母提取物5g/L、蛋白胨5g/L、酪朊酸钠4g/L、磷酸氢二钾2g/L、NaCl2g/L、MgSO4·7H2O0.5g/L、葡萄糖15g/L,pH值为7.0。
3.3酶活力的测定
当菌株在最佳培养基中进行发酵培养时,α-半乳糖苷酶的酶活力最高可达到3.06U/mL。
4.讨论
本研究通过对土壤样品的筛选和鉴定,成功分离出一株高产α-半乳糖苷酶的居里杆菌属菌株,并确定了最适合该菌株生长和产酶的发酵培养基。该研究提供了一个优化α-半乳糖苷酶生产的方案,并为后续相关研究提供了参考。
参考文献:
1.LiuY,LiF,ZhangJ,etal.Cloning,expressionandcharacterizationofanovelalpha-galactosidasefromBifidobacterium.BMCBiotechnology,2018,18(1):65.
2.SunS,WuX,XueY,etal.Optimizationofmediumcomponentsforenhancingα-galactosidaseproductionbyAspergillusoryzaeusingresponsesurfacemethodology.JournalofFoodScience&Technology,2016,53(1):777-783.
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