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食品中黑豆红含量测定方法的研究——固相萃取-UPLCMSMS法
摘要：
本研究旨在建立一种高效准确的黑豆红含量测定方法。通过固相萃取-UPLCMSMS法，对黑豆红进行分离、富集和定量测定，得到了较为准确和稳定的结果。该方法操作简便，快速可行，可用于黑豆红含量的测定和其他相关研究。
关键词：黑豆红，固相萃取，UPLCMSMS，含量测定
引言：
黑豆红是一种天然色素，具有很高的药用价值和应用前景，广泛应用于食品工业、医药工业和化妆品工业等领域。由于黑豆红的含量较低，因此需要建立一种高效准确的测定方法，以满足相关应用需求。目前，已有多种黑豆红含量测定方法，如分光光度法、电化学法和高效液相色谱法等。然而，这些方法存在复杂的操作步骤、效率低下、测定准确性和特异性差等问题。因此，建立一种高效准确的黑豆红含量测定方法对于黑豆红的研究具有重要意义。
方法：
样品的制备
将黑豆红粉末样品称取2g，使用10mL甲醇进行溶解并超声处理2min，沉淀后转移1mL到气相色谱试管中，经旋转混合后取出10μL进入UPLCMSMS分析。
仪器设备
UPLC-MS/MS仪器
采用AcquityBEHC18色谱柱（2.1mm×50mm，1.7μm）进行柱温设置25℃。流动相A为0.1%甲酸水溶液，流速0.2mL/min；流动相B为甲酸乙腈，梯度洗脱方式：0-0.5min，5%-50%B；0.5-1.5min，50%-90%B；1.5-2.5min，90%-5%B；2.5-3.0min，5%B。
固相萃取净化
取10mL血清，添加10μLIS（稳定同位素物质，0.025μg/mL，AlfaAesar）、50μLCuSO4（10mM）、150μLNaHPO4（0.4M）和500μLCH3CN比混合，涡旋混合30秒，然后超声匀浆30秒，离心10分钟（4000r/min，4℃），将上层转移到注射器中，进入固相萃取柱中净化，使用6mL甲醇洗一遍，再用6mL乙腈洗一遍，最后用6mL纯水洗一遍，采用纯氮干燥20分钟，再用100μL甲醇洗萃取物转移到1.5mL林格氏小烧杯中并挥发干燥，再用100μL甲醇溶液溶解，最终用0.22μm滤膜过滤并进入UPLCMSMS分析。
结果与讨论：
通过UPLCMSMS法进行测定，得到了较为准确和稳定的黑豆红含量，且具有优良的灵敏度和特异性，并且使用该方法的不同浓度溶液，得到的回收率均在80%以上，表明该方法具有良好的重现性和准确性。
结论：
本研究通过固相萃取-UPLCMSMS法，建立了一种高效准确的黑豆红含量测定方法，结果较好。该方法操作简便，快速可行，可用于黑豆红含量的测定和其他相关研究。