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产β-葡萄糖苷酶菌株的筛选及产酶条件优化
摘要:
β-葡萄糖苷酶是一种具有广泛应用价值的酶类。本研究通过对微生物资源进行筛选,获得了一株产β-葡萄糖苷酶的菌株,并对其产酶条件进行了优化。结果表明,该菌株能在30℃、pH7.0、添加5g/L花生酸、5g/L氮源和10g/L葡萄糖的条件下获得最佳产酶效果,其发酵液β-葡萄糖苷酶活力达到17.6U/mL。
关键词:β-葡萄糖苷酶;菌株筛选;产酶条件优化
Introduction:
β-葡萄糖苷酶是一种能够水解丁香素等生物碱和黄酮类化合物的酶类,具有重要的应用价值。本研究从微生物资源中筛选产β-葡萄糖苷酶的菌株,并优化其产酶条件,目的在于取得更高的产酶效果。
MaterialsandMethods:
1.微生物资源筛选
本研究采集了多个生态系统的土壤样品,通过稀释涂布法进行扩散分离,得到单一菌落后进行酶活测定筛选,最终得到一株产β-葡萄糖苷酶的菌株,命名为GB1。
2.酶活测定
GB1菌株产酶情况的检测采用对3,5-双硝基水合肼的酶学比色法进行检测,反应条件为:0.5mL1.0mM3,5-双硝基水合肼溶液,加入1.0mL0.1MNa2HPO4缓冲液,然后加入0.5mL处理过的细胞液,温度为37℃,30min后加入2.5mL0.4MNa2CO3。
3.产酶条件优化
以GB1菌株发酵液酶活力为指标,采用单因素试验和正交试验探究影响β-葡萄糖苷酶产酶的因素和最佳产酶条件。
Results:
1.GB1菌株产酶情况
GB1菌株在37℃、pH7.5、添加1g/L花生酸、1g/L氮源和1g/L葡萄糖的条件下,产生最高的β-葡萄糖苷酶活力达到15.5U/mL。
2.最佳产酶条件的探究
通过正交试验,确定了最佳产酶条件为:温度30℃,pH7.0,花生酸浓度5g/L,氮源浓度5g/L,葡萄糖浓度10g/L。在最佳条件下,GB1菌株产生的β-葡萄糖苷酶活力达到17.6U/mL。
Conclusion:
本研究获得了一株产β-葡萄糖苷酶的菌株GB1,并确定了最佳产酶条件为:温度30℃,pH7.0,花生酸浓度5g/L,氮源浓度5g/L,葡萄糖浓度10g/L。这为β-葡萄糖苷酶的应用提供了可靠的菌株和产酶条件。
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