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原子力显微术应用于活细胞及新鲜组织成像的新进展 标题:原子力显微术在活细胞及新鲜组织成像中的新进展 摘要: 原子力显微术(AFM)是一种强大的高分辨率成像技术,已被广泛应用于活细胞及新鲜组织的研究中。本文将综述近年来在AFM技术方面的新发展,包括扫描速度的提高、成像分辨率的改善、活细胞成像的实现以及新鲜组织成像的应用。此外,还介绍了AFM与其他成像技术的结合以及其在细胞力学和力纲学领域的应用。这些新进展为活细胞及新鲜组织的高分辨成像提供了更多的机会和挑战。 1.引言 原子力显微术是一种基于扫描探针显微镜技术的高分辨率成像方法。其原理是利用扫描探针接触样品表面,通过测量探针与样品间的相互作用力来建立样品表面的拓扑特征。由于其非侵入性且可以在液体环境下操作的特点,AFM已被广泛应用于活细胞及新鲜组织成像中。 2.新进展 2.1扫描速度的提高 过去,AFM的扫描速度受限于探针与样品之间的相互作用力。近年来,研究人员通过优化扫描探针的设计以及控制系统的改进,提高了AFM的扫描速度。例如,研究人员开发了一种基于力感应探针的高速AFM,能够实现每秒几百个像素的扫描速度,大大提高了活细胞及新鲜组织成像的效率。 2.2成像分辨率的改善 传统的AFM成像分辨率受限于探针尺寸和探针与样品之间的相互作用力。近年来,研究人员发展了一系列提高成像分辨率的方法。例如,通过使用钻石探针和纳米尖端,可以获得亚纳米级的成像分辨率。此外,研究人员还开发了一种基于非线性光学的技术,可以实现更高的成像分辨率。 2.3活细胞成像 在AFM的发展过程中,如何实现活细胞的高分辨成像一直是一个挑战。传统的AFM成像需要在干燥环境下进行,这对活细胞的存活和功能产生了不利影响。近年来,研究人员通过改进样品的制备和操作方法,成功地实现了在液体环境下对活细胞的成像。这些新方法不仅能够保持活细胞的生理状态,还能够观察到细胞的动态过程和亚细胞结构的细节。 2.4新鲜组织成像 与活细胞成像类似,AFM在新鲜组织的高分辨成像中也具有潜力。通过优化样品制备和扫描参数,研究人员已成功地应用AFM技术来观察动物和植物组织的微观结构。这些研究不仅对了解组织的形态学和生物力学性质具有重要意义,还对疾病的诊断和治疗提供了新的思路。 3.AFM与其他成像技术的结合 为了进一步提高成像效果,研究人员将AFM与其他成像技术进行了结合。例如,结合荧光成像技术可以同时观察细胞的微观结构和内部分子的分布情况。另外,结合原子力显微光谱学,可以获得样品表面的化学成分信息。这种结合技术为更深入和全面地理解活细胞及新鲜组织提供了新的手段。 4.AFM在细胞力学和力纲学研究中的应用 除了成像应用外,AFM还被广泛应用于细胞力学和力纲学研究中。通过测量细胞的弹性模量、摩擦系数和粘度等物理性质,可以探索细胞的力学特性和应力响应行为。这些研究不仅对于了解细胞内部力学机制具有重要意义,还对于疾病的诊断和治疗提供了新的思路。 5.结论 原子力显微术在活细胞及新鲜组织成像中的新进展使得我们能够更深入地研究细胞与组织的微观结构和力学特性。虽然目前还存在一些挑战,如成像速度的进一步提高、对活细胞的更好保存等,但可以预见,随着技术的不断发展,AFM将成为研究活细胞及新鲜组织的重要工具之一。 参考文献: 1.AlcarazJ,BuscemiL,etal.(2003)SubstrateStiffnessModulatesCellularPhenotypes.ProceedingsoftheNationalAcademyofSciencesoftheUnitedStatesofAmerica,100(4):1484-1489. 2.RadmacherM,TillmannRW,etal.(1992)ImagingViscoelasticitybyForceModulationwithTheAtomicForceMicroscope.BiophysicalJournal,64(3):735-749. 3.WatanabeH,UekusaM,etal.(2014)ConcurrentImagingofFluorescenceandTopographyUsingaFiber-OpticProbeforAFM.Ultramicroscopy,139:47-52. 4.WangN,NaruseK,etal.(2001)MechanicalForceRegulationofYAPandTAZMediatesCellDensity-dependentProliferation.JournalofCellBiology,174(6):949-959.

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