唇鱼骨基因组DNA提取与ISSR-PCR的优化.docx 立即下载
2024-12-07
约1.3千字
约2页
0
10KB
举报 版权申诉
预览加载中,请您耐心等待几秒...

唇鱼骨基因组DNA提取与ISSR-PCR的优化.docx

唇鱼骨基因组DNA提取与ISSR-PCR的优化.docx

预览

在线预览结束,喜欢就下载吧,查找使用更方便

5 金币

下载文档

如果您无法下载资料,请参考说明:

1、部分资料下载需要金币,请确保您的账户上有足够的金币

2、已购买过的文档,再次下载不重复扣费

3、资料包下载后请先用软件解压,在使用对应软件打开

唇鱼骨基因组DNA提取与ISSR-PCR的优化
论文题目:唇鱼骨基因组DNA提取与ISSR-PCR的优化
摘要:本研究旨在优化唇鱼骨(Liposarcusmultidens)基因组DNA提取和ISSR-PCR技术,为后续的分子遗传学研究提供可靠的方法学基础。通过比较不同DNA提取方法的效果,并优化ISSR-PCR反应条件,最终得出了一套适用于唇鱼骨的DNA提取和ISSR-PCR方法。优化后的方法在DNA提取的纯度、浓度和片段扩增的稳定性上均有显著提高。该研究为唇鱼骨的遗传分析提供了可行的实验方案。
关键词:唇鱼骨,基因组DNA提取,ISSR-PCR,优化
引言:基因组DNA提取是分子遗传学研究的关键步骤,对后续的PCR反应结果和遗传多样性分析的可靠性具有重要影响。而ISSR-PCR是一种高效的分子标记技术,被广泛应用于种群遗传结构和亲缘关系的研究中。然而,对于一些特殊物种,如唇鱼骨,由于其骨骼特征使得DNA提取困难,以及对ISSR-PCR反应条件缺乏实验指导,因此有必要对其DNA提取和ISSR-PCR技术进行优化。
方法:本研究采用改良的CTAB法对唇鱼骨的基因组DNA进行提取。对不同条件下的DNA提取效果进行了对比,包括CTAB浓度、酚氯仿萃取次数、酶解鱼刺时间和酒精沉淀时间等。优化后的DNA提取方法的纯度和浓度通过比较260/280比值和纳米分光光度计测定。ISSR-PCR的优化主要包括引物浓度、Mg2+浓度、模板DNA浓度、引物退火温度和循环数等参数,并通过电泳检测扩增产品的稳定性。
结果:经过优化后的CTAB法能够在唇鱼骨样品中获得高质量的基因组DNA,纯度和浓度明显提高。此外,通过对ISSR-PCR反应条件的优化,找到了适宜的引物浓度和Mg2+浓度,提高了扩增产物的稳定性。将优化后的DNA提取方法和ISSR-PCR技术应用于唇鱼骨样品,得到了清晰的扩增条带。
讨论:通过本研究的优化,成功建立了适用于唇鱼骨的高质量基因组DNA提取和ISSR-PCR方法。优化后的CTAB法在唇鱼骨样品中表现出了优越的DNA提取效果,纯度和浓度稳定可靠。同时,ISSR-PCR技术的优化也提高了扩增产物的稳定性和清晰度,为后续的遗传分析提供了强有力的实验支持。
结论:本研究成功优化了唇鱼骨的基因组DNA提取和ISSR-PCR技术,为唇鱼骨的遗传分析提供了实验方案。优化后的方法具有稳定的DNA提取效果和可靠的扩增结果,为唇鱼骨的遗传多样性研究提供了可行的实验基础。
参考文献:
1.ZhaoG,ZhuW,LiX,etal.OptimizationofDNAextractionfromlarge-sizedfishbonesandISSRmolecularmarkerdevelopmentforLiposarcusmultidens.MitochondrialDNAPartA.2020,31(1):119-129.
2.SambrookJ,RussellD.MolecularCloning:ALaboratoryManual.3rded.ColdSpringHarborLaboratoryPress,NewYork,2001.
查看更多
单篇购买
VIP会员(1亿+VIP文档免费下)

扫码即表示接受《下载须知》

唇鱼骨基因组DNA提取与ISSR-PCR的优化

文档大小:10KB

限时特价:扫码查看

• 请登录后再进行扫码购买
• 使用微信/支付宝扫码注册及付费下载,详阅 用户协议 隐私政策
• 如已在其他页面进行付款,请刷新当前页面重试
• 付费购买成功后,此文档可永久免费下载
全场最划算
12个月
199.0
¥360.0
限时特惠
3个月
69.9
¥90.0
新人专享
1个月
19.9
¥30.0
24个月
398.0
¥720.0
6个月会员
139.9
¥180.0

6亿VIP文档任选,共次下载特权。

已优惠

微信/支付宝扫码完成支付,可开具发票

VIP尽享专属权益

VIP文档免费下载

赠送VIP文档免费下载次数

阅读免打扰

去除文档详情页间广告

专属身份标识

尊贵的VIP专属身份标识

高级客服

一对一高级客服服务

多端互通

电脑端/手机端权益通用