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Waters-600-HPLC操作培训.ppt

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Waters600HPLC操作培训泵梯度运行控制界面一、操作功能画面说明2.Direct:等度(Isocratic)操作设定3.OperateMethod:执行梯度(GRADIENT)功能操作4.ProgramMethod-编辑梯度表(GradientTable)5.ProgramMethod-编辑事件表(EventTable)二、基本操作说明(ISOCRATIC)3.按一下“setup”功能键,即进入Pumpsetup画面。4.移动光标设定欲使用溶剂瓶A,B,C或D的氦气法脱气装置开关,使其为ENABLE(按“1”,Enter→ENABLE打开;按“0”,Enter→DISABLE关闭)
5.如果有使用色谱柱加热装置,设定上限温度数值(应低于溶剂沸点);
6.设定系统压力上限数值为4000psi;
7.按一下”Direct“功能键,即进ISOCRATIC画面。8.设定氦气脱气装置(SPARGE)流量为100,此时可见到溶剂瓶内有气体吹出之状态,维持约30min后,可降低至30以节省氦气;
9.将Pump中间之参比阀(ReferenceValve)扳手往右扳开,设定Pump流速1.0mL/min,Enter,启动Pump流速;
11.若有使用其它溶剂瓶,请重复前一步骤直到所有溶剂抽取完毕为止;
12.设定Pump流速15.0mL/min(注意:确认参比阀是往右扳开的),Enter,启动Pump高流速来排挤管路内之气泡;
13.确认溶剂排出是呈连续不间断之状态,然后按一下“StopFlow”相对屏幕功能键,停止Pump流速,再将溶剂排出阀门(Referencevalve)扳手往左压紧;
14.安装色谱柱,设定流速至使用的范围(约1.0~2.0mL/min),以及流动相比例(注意:%A+%B+%C+%D=100%),待系统平衡稳定后,即可开始进样做分析检测.
注意事项:
(1)当使用无机盐类流动相后,须以超纯水冲洗,再以甲醇冲洗;
(2)若此Pump是以IEEE-488联机做计算机控制时,以上之操作条件参数必须在Millennium计算机软件操作方法内加以储存设定,才得以有效之控制。
三、程序化(Gradient)操作方法(2)可先按一下“CLEARTABLE”键,消除表格内原设定条件,然后在Gradient表上的Time(洗脱时间)、Flow(流速)、%A,%B,%C,%D(溶剂比例)及Curve(变化曲线)处,逐列输入欲进行之梯度变化;注:①INITIAL为起始的条件;②%A+%B+%C+%D必须等于100%;③每一列在各项输入后,必须按Enter键;④GradientCurveShapes;
(3)梯度表编辑完成后,按一下“SAVE”键,画面上会出现EnterTableNumber(1-15)输入欲存放之表号,再按Enter键,画面上会出现ReplacewithNewTable?1=Yes0=No输入1,将梯度表储存起来。2.编辑事件(EVENT)方法表格(1)按一下“ProgramTable”功能键,即进入PROGRAMEVENT画面(2)可先按一下“CLEARTABLE”键,消除表格内原设定条件,然后在EVENT表上的Time(洗脱时间)、EVENT(事件)、ACTION(动作)处,逐列输入欲进行之事件变化;
注:事件的选择(ChoiceOfEvent)动作的选择
1-4=1-4个外接装置控制开关On/Off/Pulse
5=警示声响On/Off
6=氦气法脱气装置(SPAGE)流量0-100
7=色谱柱加热装置温度室温~90℃
8=进入某一号方法Table程序1-15
9=开始执行某一号方法Table程序1-15
10=执行紫外检测器氘灯的开关On/Off
(3)事件表编辑完成后,按一下“Save”键,画面上会出现EnterTableNumber(1-15)输入欲存放之表号,再按Enter键,画面上会出现ReplacewithNewTable?1=Yes0=No输入1,将事件表储存起来3.执行程序化方法(2)在画面上的“GradientAndEventsTable#:”输入欲执行的表号,即会同时执行梯度表与事件表之程序;
(3)再按一下“OperateMethod”功能键,即进入Gradient的准备状态(INTIAL)画面;
(4)待系统平衡稳定后,即可开始进样做分析检测;当以手动进样器或自动进样器完成进样动作时,将会有一触发讯号同时启动程序动作,可看到Time(洗脱时间)开始计时与溶剂比例的变化;
注:若手动按一下”STARTRUN”键,亦可启动程序动作。
(5)使用中途或分析完成后,可再按一下“INITIAL”功能键,让Pump回复至程序的起始条件,以便继续做下一个分析检测。4.中止执行程序化方法(2)如果是因不
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