真核细胞染色体DNA结构讲课教案.ppt

（四）真核细胞染色体DNA结构6个核小体念珠绕成30nm纤丝（fiber)真核生物染色体DNA组装不同层次的结构真核生物DNA的序列特点2．回文结构（palindromicstructure）发夹形和十字形（一）RNA的类别
1.由A,U,G,C四种碱基组成。
2.含有较多的稀有碱基。
3.大部分的RNA中,A≠U;G≠C。
4.mRNA的碱基组成与DNA非常相似(U代替T),有人称D-RNA。（三）RNA的一级结构
天然RNA分子都是单链线形分子，只有部分区域是A-型双螺旋结构。3．RNA分子中核苷酸的排列顺序四．几类RNA的一级结构（2）rRNA的一级结构真核生物核糖体原核细胞mRNA的结构特点真核生物mRNA的一级结构:5´-capm7G-5´ppp-5´Nmp
3´-polyA:polyA的残基数20~200个，或更多。（三）RNA的二级结构RNA中双螺旋结构稳定的因素主要是碱基堆积力，其次是氢键。一、tRNA的二级结构氨基酸接受臂1980年牛心线粒体tRNAser只有63个核苷酸，沉降常数3S，缺少D环和D臂，呈二叶草型。2．rRNA的二级结构（四）RNA的三级结构X光晶体衍射解出的tRNA立体结构（一）一般性质：（二）粘度:可作为DNA变性(粘度降低)的指标（四）紫外吸收天然DNA
变性DNA
单核苷酸总吸收值紫外分光光度法应用3.判断DNA是否变性

在DNA的变性过程中，紫外吸收及摩尔消光系数增大（增色效应）
在DNA的复性过程中，紫外吸收及摩尔消光系数减小（减色效应）
增色效应（hyperchromiceffect）（五）沉降特性2．核酸的构象和分离关系（六）核酸的变性、复性2熔点（Tm）3影响Tm值的因素4复性（renaturation）（1）复性（2）影响复性的因素（3）复性动力学－－一定条件下，复性的反应速度用Cot来表示
Cot:（七）凝胶电泳凝胶电泳兼有分子筛效应和电荷效应琼脂糖凝胶电泳在紫外光下显色M：λDNA（HandⅢ+EcoRI）双切Marker
Lane1：质粒对照，目的片段为1.28kb
Lane2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、13、14、15、16：GUS阳性植株，扩出约1.3Kb的带。
Lane11：未转基因植株对照。（八）杂交（hybridization）1975年英国E.M.Southern首创的Southernblotting
---------（Southern印迹）八、核酸的分离、纯化和核苷酸的制备抑制DNase：抑制RNase：（二）大分子DNA的提取3．去蛋白质4．沉淀DNA:水相中的DNA可被0.3MNaAC-70%乙醇沉淀。
*原核生物的DNA是裸露的，与蛋白质结合不多，分离纯化要简单些。（三）RNA的提取工业上制备RNA（四）核酸纯度鉴定（五）核酸含量的测定本章重点及难点

重点：掌握核酸构件分子的结构特点、代号；掌握DNA二级结构特点、稳定力、三级结构特点及有关概念；掌握RNA二级结构特点、类型；了解核酸的重要理化性质。
难点：构件分子的结构特点，DNA二级结构要点及三级结构有关概念，tRNA二级结构特点、真核生物mRNA二级结构特点，核酸理化性质中涉及的概念及应用。1、热变性的DNA分子在适当条件下可以复性，条件之一是（）A、骤然冷却B、缓慢冷却C、浓缩D、加入浓的无机盐2、tRNA的分子结构特征是：（）A、有反密码环和3’—端有—CCA序列B、有密码环C、有反密码环和5’—端有—CCA序列D、5’—端有—CCA序列3、下列关于DNA分子中碱基组成的定量关系哪个是不正确的？（）A、C+A=G+TB、C=GC、A=TD、C+G=A+T4、具5’－CpGpGpTpAp-3’顺序的单链DNA能与下列哪种RNA杂交?（）A、5’-GpCpCpAp-3’B、5’-GpCpCpApUp-3’C、5’-UpApCpCpGp-3’D、5’-TpApCpCpGp-3’5、下列关于mRNA描述哪项是错误的？（）A、原核细胞的mRNA在翻译开始前需加“PolyA”尾巴B、真核细胞mRNA在3’端有特殊的“尾巴”结构C、真核细胞mRNA在5’端有特殊的“帽子”结构6、Tm是指()的温度A、双螺旋DNA达到完全变性时B、双螺旋DNA开始变性时C、双螺旋DNA结构失去1/2时D、双螺旋结构失去1/4时
7、稀有核苷酸碱基主要见于()A、DNAB、mRNAC、tRNAD、rRNA
8、双链DNA的解链温度的增加，提示其中含量高的是（）A、A和GB、C和TC、A和TD、C和G
9、某双链DNA纯样品含15％的A，该样品中G的含量为（）A、35％B、15％C、30％D、20％1、杂交双链是指DNA双链分开后两股单链的重新结合。（）2、tRNA的二级结构是倒L型。（）3、DNA分子中