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2014生物技术制药简答

第一篇：2014生物技术制药简答生物技术发展简史：1.传统生物技术阶段：技术特征：酿造技术；特点:自然发酵、全凭经验。2.近代生物技术阶段：技术特征：微生物发酵技术。特点：产品类型多；生产技术要求高；生产设备规模巨大；技术发展速度快。3.现代生物技术：技术特征：基因工程技术。生物技术药物的特性：1.高技术：知识密集、技术含量高、多学科高度综合互相渗透。2.高投入：平均费用1-3亿美元。3.长周期：8-10年。4.高风险：成功率5%-10%。5.高收益：2-3年收回所有投资，利润回报高达10倍以上。基因工程技术生产药物的优点？1.大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽，为临床使用提供有效的保障；2.可以提供足够数量的生理活性物质，以便对其生理、生化和结构进行深入的研究，从而扩大这些物质的应用范围；3.可以发现、挖掘更多的内源性生理活性物质；4.源生理活性物质在作为药物使用时存在的不足之处，可通过基因工程和蛋白质工程进行改造和去除；5.可获得新型化合物，扩大药物筛选来源。基因工程技术制药的主要步骤？1.获取目的基因；2.目的基因与运载体结合；3.将目的基因导入受体细胞；4.目的基因的表达和鉴定。人工合成目的基因的限制有哪些？1.不能合成太长的基因；2.由于遗传密码简并性，合成的基因不一定与天然基因完全一致，易造成中性突变；3.费用较高。基因工程宿主菌应满足哪些条件？1.具有高浓度、高产量、高产率；2.不致病、不产生内毒素；3.发热量低，需氧低，适当的发酵温度和细胞形态；4.容易进行代谢调控；5.容易进行重组DNA技术；6.产物容易提取纯化。表达载体须具备哪些条件？①载体能够独立的复制。②应具有灵活的克隆位点和方便的筛选标记，以利于外源基因的克隆、鉴定和筛选。③应具有很强的启动子，能为宿主菌的RNA聚合酶所识别。④应具有阻遏子，使启动子受到控制，只有当诱导时才能进行转录。⑤应具有很强的终止子，以使RNA聚合酶集中力量转录克隆的外源基因，而不转录其他无关的基因，同时很强的终止子所产生的mRNA较为稳定。⑥所产生的mRNA必须具有翻译的起始信号真核基因在大肠杆菌的表达形式有哪些？1.融合蛋白表达方式；2.非融合蛋白表达方式；3.分泌蛋白表达方式影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素有：1.外源基因的拷贝数;2.外源基因的表达效率;3.表达产物的稳定性;4.细胞的代谢符合;5.工程菌的培养条件.动物细胞的生理特点：1.细胞分裂周期长，动物细胞分裂所需时间一般为12~48h。2.细胞生长需贴附于基质，有接触抑制现象。3.二倍体细胞寿命有限。4.对生长环境要求敏感。5.培养基要求高。6.合成的蛋白质有修饰动物细胞培养时加入血清的作用机制：1.提供基本营养物质；2.提供激素和各种生长因子；3.提供贴附因子和伸展因子；4.对培养中的细胞起到某些保护作用无血清培养基的优点：1.提高了细胞培养的可重复性，避免了由于血清批次之间差异的影响。2.减少了由血清带来病毒、真菌、和支原体等微生物污染的危险。3.供应充足、稳定。4.细胞产品易于纯化。5.避免了血清中某些因素对有些细胞的毒性。6.减少了血清中蛋白对某些生物测定的干扰，便于对实验结果的分析。动物细胞悬浮培养、贴壁培养的优缺点：动物细胞悬浮培养：该培养方法的优点是操作简便，培养条件比较均一，传质和传氧较好，容易扩大培养规模，在培养设备的设计和实际操作中可借鉴许多有关细菌发酵的经验。不足之处是由于细胞体积较小，较难采用灌流培养，因此细胞密度一般较低。动物细胞贴壁培养：优点是适用的细胞种类广，较容易采用灌流培养的方式使细胞达到高密度；不足之处是操作比较麻烦，需要合适的贴附材料和足够的面积，培养条件不易均一，传质和传氧较差，这些不足常常成为扩大培养的“瓶颈”。动物细胞生物反应器的类型有哪些？1.搅拌罐式反应器。2.气升式生物反应器。3.中空纤维式生物反应器。4.透析袋或膜式生物反应器。5.固定床或流化床式生物反应器。生产用动物细胞的种类：原代细胞，二倍体细胞，转化细胞，融合细胞，基因工程重组细胞。基因工程抗体的类型：1)人-鼠嵌合抗体：由人抗体的恒定区与鼠源单抗的可变区融合得到。2)改型抗体：把鼠抗体的CDR序列移植到人抗体的可变区内，所得到的抗体。3)小分子抗体小分子抗体包括：Fab、Fv或ScFv、单域抗体、最小识别单位。单克隆抗体的制备流程及方法。流程：将有用抗原免疫过的淋巴细胞与骨髓瘤用PEG进行杂交融合。①把融合的细胞在HAT培养基上选择出来。②将选择后的整合细胞分散，培养成杂交瘤细胞。③使能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞克隆化。④杂交瘤细胞抗体的性状的鉴定。⑤单克隆抗体的大量制备，一是在培养液中大更是繁殖，二是注入纯系小鼠腹腔中大量繁殖。⑥单克隆抗体的纯化。动物体内诱生法制