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细胞生物学实验总结

第一篇：细胞生物学实验总结细胞自主实验方法总结自主实验是在老师的指导和帮助下学生自己设计实验且自己准备实验所需的一切准备工作来完成的实验。平时做实验老师占重要地位但自主实验中学生占重要地位。自主实验中学生自己思考设计出实验方案，实验所需试剂，实验方法和步骤然后按该方案来做实验。老师让学生做自主实验的原因是老师想培养学生的动手能力，合作能力，想让学生独立思考，想让学生亲自动手做实验，最重要的一点是把理论知识结合实践。细胞培养是在体外模拟体内的生理环境，培养从机体中取出的细胞，并使之生存和生长的技术为细胞培养技术。本实验采用了微量全血培养技术，培养人体外周血小淋巴细胞,使原处于G0期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞,进而进行有丝分裂，增殖成功率高、技术方法完善。把体外增殖的小淋巴细胞裂解,对细胞核染色体进行染色和固定,制得人染色体标本,用于进行染色体组型分析，取得了令人满意的效果。人和动物细胞培养是动物细胞工程的一项基本技术。目前,动物细胞培养主要用于通过大量的细胞培养获得有经济价值的生物产品和细胞本身。1966年以前基本上用Moorhead等，1960年建立的人外周血白细胞培养技术,该方法比较完善,成功率高。但缺点是取血量多,手续较麻烦。近30多年来国内外绝大多数均采用微量全血培养技术,不但取血量少,而且可略去一些繁琐操作过程,如离心、分离血浆等,做起来既方便,也节省人力和物力,比较适于推广和使用。本实验对实验操作要求比较高。实验进行前，无菌室及无菌操作台以紫外灯照射30-60分钟灭菌，以70%酒精擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10分钟后，才开始实验操作。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70%酒精擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。操作做成中也要保证不污染。第二篇：细胞生物学实验思考题细胞生物学实验思考题1、为什么暗视场照明的视场暗黑，而样品像明亮？相差显微镜镜检时，为什么要用绿色滤色镜观察活体样本？暗视场显微镜照明光线不直接进入物镜，只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜，因而视野的背景是黑的，物体的边缘是亮的；为获得好的效果，要用波长范围窄的单色光，选用绿色滤光镜，不但可满足这个要求，而且绿色可吸收红外光，减少发热。2、为什么活细胞不易染色，从细胞生物学角度解释原因。染色剂一般有剧毒，而细胞膜具有选择透过性，会将一部分对细胞有害的物质阻挡在细胞外，所以活细胞难以染色。而当细胞死亡后，细胞膜失去选择透过性，染色剂得以进入，细胞就被染色。3、简述中性红染液、詹纳斯绿B染液用于细胞超活染色的原理。JanusgreenB活体细胞染色的机理：JanusgreenB是毒性较小的碱性染料，可专一性地对线粒体进行超活染色，这是由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用，使染料始终保持氧化状态（即有色状态），呈蓝绿色；而线粒体周围的细胞质中，这些染料被还原为无色的色基（即无色状态）。Neutralred碱性染料活体染色的机理：neutralred为弱碱性染料，对液泡系（即高尔基体）的染色有专一性，只将活细胞中的液泡系染成红色，细胞核与细胞质完全不着色，这可能与液泡中某些蛋白质有关。4、什么是细胞骨架？它有何主要功能？生物学中细胞骨架指真核细胞中与保持细胞形态结构和细胞运动有关的纤维网络。包括微管、微丝和中间丝。细胞骨架不仅在维持细胞形态，承受外力、保持细胞内部结构的有序性方面起重要作用，而且还参与许多重要的生命活动，如：在细胞分裂中细胞骨架牵引染色体分离，在细胞物质运输中，各类小泡和细胞器可沿着细胞骨架定向转运；在肌肉细胞中，细胞骨架和它的结合蛋白组成动力系统；在白细胞(白血球)的迁移、精子的游动、神经细胞轴突和树突的伸展等方面都与细胞骨架有关。另外，在植物细胞中细胞骨架指导细胞壁的合成。5、列举你所知道的动、植物细胞中由微丝组成的结构。肌原纤维、微绒毛、应力纤维6、显示细胞骨架的原理是什么？说明实验中使用的TritonX-100、戊二醛、考马斯亮蓝R-250的作用。原理：用考马斯亮蓝对细胞骨架进行染色，染色观察前，应首先用去垢剂抽提掉胞质中的除骨架以外的其他蛋白。TritonX-100：非离子型去垢剂，可使细胞质膜中和细胞质中的蛋白质和全部脂质被溶解抽提。戊二醛：固定细胞考马斯亮蓝R-250：蛋白质染料，对细胞骨架染色。7、显示脂类时，制片及染色有何特殊之处？制片时需要用10%甲醛钙固定液进行固定，要求用苏丹Ⅲ饱和溶液染色，但是对不同部位的脂类进行处理时有区别。8、简述Fenulgen反应的原理和实验的关键步骤。原理：DNA经弱酸水解后，嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键打开，并且使脱氧核糖与磷酸间的磷脂键打开，在脱氧核糖的一端形成游离的醛基，醛基在原位与Schiff试剂结合