血管内皮生长因子在先兆子痫大鼠肾损伤中的作用.docx

血管内皮生长因子在先兆子痫大鼠肾损伤中的作用【摘要】目的研究血管内皮生长因子（VEGF）在先兆子痫大鼠肾损伤中的作用。方法采用一氧化氮合酶抑制剂复制大鼠先兆子痫模型通过双抗酶联免疫吸附法检测血浆及尿液中VEGF含量应用原位杂交法测定肾小球VEGFmRNA转录水平利用免疫组化法检测肾小球VEGF蛋白表达情况。结果在先兆子痫大鼠中尿液中VEGF含量（以尿VEGF/尿肌酐表示）升高且与肾脏局部VEGF的表达强度呈正相关肾小球局部VEGFmRNA和VEGF蛋白表达均增强且表达的强度与24h尿蛋白排泄量呈正相关。结论尿液VEGF可能来源于肾脏局部的分泌肾小球VEGF可能参与了先兆子痫中大量蛋白尿的产生。【关键词】血管内皮生长因子；先兆子痫；蛋白尿【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectofvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)inkidneylesionofratswithpreeclampsia.MethodsAratmodelofpreeclampsiawasdevelopedbyinhibitorofnitricoxidesynthase.PlasmaandurinaryVEGFweredeterminedusingasandwichenzymeimmunoassay.ThelevelofVEGFmRNAinglomeruliwasmeasuredbyinsituhybridization.TheexpressionofVEGFproteininglomeruliwasdetectedbyimmunohistochemistrymethod.ResultsInratswithpreeclampsiaurinaryVEGFlevels(expressedasVEGF/creatinineratio)weresignificantlyhigherandpositivelycorrelatedtotheexpressionofVEGFinglomerulithelevelofVEGFmRNAandtheexpressionofVEGFweresignificantlyhigherthanothergroups.TherewasapositivecorrelationbetweentheexpressionofVEGFinglomeruliand24hurinaryproteinexcretion.ConclusionCorrectedurinaryVEGFlevelscanstandfortheexpressionofVEGFinglomeruli.VEGFinglomerulimightbeinvolvedinthemechanismofproteinuriainpreeclampsia.【Keywords】vascularendothelialgrowthfactor；preeclampsia；proteinuria先兆子痫是引起孕产妇及围生儿死亡的重要原因肾脏损伤所致的大量蛋白尿为其主要的临床表现。引起肾小球滤过膜通透性增高的原因目前不详。血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactorVEGF）是一种强效的增强血管壁通透性的生物活性物质［1］。有研究表明血浆及胎盘蜕膜局部VEGF水平的改变可能与妊高征的发病有关。但血浆、尿液VEGF水平与肾脏局部VEGF表达的关系及肾脏局部VEGF的表达与先兆子痫肾损伤的关系至今国内外尚未有研究。本试验拟通过一氧化氮合酶抑制剂——亚硝基左旋精氨酸甲酯（L-nitro-arginineL-NAME）复制大鼠先兆子痫模型［2］检测血浆、尿液中VEGF浓度观察肾小球中VEGF的表达及其表达的强弱与24h尿蛋白排泄量的关系从而探讨VEGF在先兆子痫肾损伤中的作用。1材料与方法1.1主要试剂与仪器L-NAME（美国Sigma公司）VEGFElisa试剂盒（北京中山生物有限公司）地高辛标记的VEGFmRNA探针（德国Biognostik公司）VEGF多克隆抗体（SantaCruz公司）SABC试剂盒（武汉博士德生物制品公司）大鼠尾动脉袖带式血压计（由同济医学院心血管研究中心