血细胞分析作业指导书.doc

血细胞分析检验程序1检验目的检测血液中血细胞(红细胞、白细胞和血小板)数量、白细胞分类及相关参数(HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW及MPV等)的变化对临床有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果具有重要参考价值。2检测原理血常规检查方法采用血细胞自动分析仪法，参见《全国临床检验操作规程》p7～11，部分白细胞分类计数采用显微镜检查法，参见《全国临床检验操作规程》p5～7。2.1电阻抗法血细胞计数（光电6318-K）：即在细胞检测器微孔的两侧各有一个电极，两电极间通有恒定电流，经过稀释液(电解质溶液)稀释的血样(血细胞)在通过检测器微孔时，产生了一个电脉冲；脉冲的高低代表细胞体积的大小，脉冲的个数代表细胞的数量。2.2细胞化学和光散射法白细胞计数(Ac.T5-diff)：即将血液经过细胞化学试剂染色，不同的白细胞胞浆内部即可出现不同的酶化学反应。当这些细胞通过测量区时，由于酶反应强度不同和细胞体积大小差异，激光束射到细胞上的前向角和散射角不同，以X轴为吸光率，Y轴为光散射，每个细胞产生两个信号结合定位在细胞分布散点图上。计算机对存储的测量信息进行分析处理，得出白细胞总数和分类计数结果。2.3多角度激光法白细胞计数(XE-2100XT-1800i)：在白细胞分类通道：全血加入溶血剂(FD-Ⅰ和FD-Ⅱ)作用后，嗜酸性粒细胞内颗粒被染色；其它白细胞略有皱缩。WBC/BASO通道：全血加入溶血剂(FB)溶血。除BASO外，其它白细胞均明显皱缩。仪器从低角度及高角度分析白细胞的内部结构。计算机对存储的测量信息进行分析处理，得出白细胞总数和分类计数结果。2.4光电比色法测量血红蛋白：在稀释的血样中加入溶血剂使红细胞膜破裂释放出血红蛋白，后者与溶血剂中有关成分结合形成Hb衍生物，进入Hb测试系统，在特定波长(一般在530～550nm)下比色，吸光度的变化与液体中Hb含量成正比，仪器便可显示其浓度。不同型号的血细胞分析仪配套溶血剂配方不同，形成的Hb衍生物亦不同，其吸收光谱各异但最大吸收均接近540nm。2.5光散射法红细胞和血小板计数(Ac.T5-diff)：以二维激光散射法检测红细胞和血小板。红细胞测试原理是：在测试系统中，全血与红细胞/血小板稀释液混合，使自然状态下双凹盘状扁平圆形的红细胞成为球形并经戊二醛固定，此种处理并不影响MCV体积。红细胞无论以何种方位通过测量区时，被激光束照射后所得的信号是相同的。激光束以低角度前向光散射和高角度光散射同时测量一个红细胞，根据低角度光散射转换能量大小，测量单个红细胞体积与总数；根据高角度光散射得出单个红细胞内血红蛋白浓度。血小板与红细胞在一个系统中测量，其原理是：根据同质性球体光散射的Mie理论，当球形化的血小板单个通过激光照射区时，仪器在两个角度测定激光的散射强度：高角度主要测细胞的折射指数(RI)，它与细胞的密度有关；低角度主要测细胞体积的大小。血小板的体积在1～30fl，RI在1.35～1.40之间。计算机对存储的测量信息进行分析处理，得出红细胞和血小板计数结果。2.6显微镜白细胞分类计数：把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片，经瑞氏染料染色后，在显微镜下根据白细胞形态特征予以分类计数，得出相对比值(百分率)，并观察细胞形态的变化。3设备性能参数血细胞分析仪的操作性能因仪器的种类与型号不同而异。3.1XE-2100XT-1800i血细胞分析仪3.1.1本仪器检测血细胞的线性范围为：WBC：(0.0～100.0)×109/L，RBC：(0.0～8.00)×1012/L；HGB：0.0～250g/L，PLT：(0.0～1000)×109/L。3.1.2本仪器检测血细胞的精密度为：WBC：±2.0%，RBC：±2.0%，HGB：±2.0%，PLT：±5.0%。3.2MEK-6108KMEK-6318K血细胞分析仪3.2.1本仪器检测血细胞的线性范围为：WBC：(0.0～99.99)×109/L，RBC：(0.00～9.99)×1012/L，HGB：0～299g/L，PLT：(10～999)×109/L。3.2.2本仪器检测血细胞的精密度为：WBC：±3.0%，RBC：±2.0%，HGB：±2.0%和PLT：±5%。3.3Ac.T5diff血细胞分析仪3.3.1本仪器检测血细胞的线性范围为：WBC：(0.4～90.0)×109/L，RBC：(0.23～7.70)×1012/L，HGB：0～229g/L，PLT：(4～1000)×109/L。3.3.2本仪器检测血细胞的精密度为：WBC：±3.0%，RBC：±2.0%，HGB：±2.0%和PLT：±6%。4标本4.1临床护士抽取患者抗凝静脉血2～3ml。4.2采血后立即送到临床检验科。4.3血量不够1ml或血液凝固、溶血或严重脂血标本不能