课题3 血红蛋白的提取和分离 (2).doc

江苏省常州市西夏墅中学高三生物血红蛋白的提取与分离复习试题人教版一．有关知识：从细胞混合物中提取、分离高纯度的有机物质（如血红蛋白）需要一定的技术（思考：叶绿体中色素的提取与分离）。血红蛋白为什么只有红细胞中才有？它是否属于内环境的成分？血红蛋白有何重要的无机盐离子？有何功能？为什么此实验要选用血红蛋白作为提取与分离的实验材料？二．分离细胞中不同种类的蛋白质的基本原理是：根据各种蛋白质的的差异来分离不同种类的蛋白质。常用方法有，，。1.凝胶色谱法是根据分离蛋白质的有效方法。相对分子质量先分离出来。2.电泳是指电泳利用了待分离样品中各种分子的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。SDS能与各种蛋白质形成蛋白质-SDS复合物，SDS所带的负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种类蛋白质间的，使电泳迁移率完全取决于。三．缓冲液的作用是生物体内进行的各种化学反应都是在进行的。四．血红蛋白的提取和分离一般分为四步：。样品处理红细胞的洗涤目的：洗涤液：洗涤次数：离心宜采用：血红蛋白的释放洗涤后的红细胞++——>释放血红蛋白，得混合液分离血红蛋白溶液混合液——>离心——>溶液分四层——>过滤除去杂质沉淀——>用分液漏斗分出下层红色透明液体（二）粗分离——透析：将血红蛋白液装入袋，将此袋放入液，透析12小时，可以去除杂质。（三）纯化——凝胶色谱操作凝胶色谱柱的制作（略）凝胶色谱柱的装填：样品的加入与洗脱加样前：加样后：洗脱：五．注意事项1.红细胞的洗涤注意点：2.凝胶色谱柱的装填注意点：3.血红蛋白分离过程中，如果，说明色谱柱制作成功。