课题3 血红蛋白的提取和分离 (3).ppt

专题5DNA与蛋白质技术（一）蛋白质提取和分离原理（二）蛋白质提取和分离的方法1.凝胶色谱法2.电泳法（三）缓冲液的作用思考1：分离生物大分子的基本思路是什么？一些微小多孔的球体（内含许多贯穿的通道，由多糖类构成如葡聚糖、琼脂糖，具多孔的凝胶就叫分子筛）4.具体过程许多重要的生物大分子，如等都具有，在下，这些基团会带上。在电场的作用下，这些带电分子会向着与其移动。电泳利用了待分离样品中各种分子以及分子本身、的不同使带电分子产生不同的，从而实现样品中各种分子的分离。影响蛋白质分子运动速度的因素琼脂糖凝胶电泳示意图聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它以及等因素。为了消除净电荷对迁移率的影响，可以在凝胶中加入。（三）缓冲溶液4.缓冲溶液组成：本课题学习初步分离血红蛋白的方法哺乳动物血液。因为该细胞中没有细胞核，血红蛋白含量高。血红蛋白二、实验设计注意事项：（一）样品处理:2.释放血红蛋白高速离心（二）粗分离——透析（三）纯化——凝胶色谱法步骤3.样品的加入和洗脱2.凝胶色谱柱的制作过程中为什么底塞中插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面？4.本实验装填凝胶色谱柱选择的材料是交联葡聚糖凝胶G-75，“G”表示什么？75代表什么？（四）纯度鉴定1.随着人类跨入蛋白质组时代，对蛋白质的研究和应用越来越深入，首先要做的一步是（）A.弄清各种蛋白质的空间结构B.弄清各种蛋白质的功能C.弄清各种蛋白质的合成过程D.获得高纯度的蛋白质3.凝胶色谱法分离蛋白质时，凝胶的种类较多，但其作用的共同点是()A.改变蛋白质分子通过凝胶时的路径B.吸附一部分蛋白质，从而影响蛋白质分子的移动速度C.将酶或细胞固定在凝胶中D.与蛋白质分子进行化学反应，从而影响其移动速度