课题3 分解纤维素的微生物的分离 (2).pptx

1.判断下列叙述是否正确（1）纤维素分解菌的选择培养基中唯一的碳源是“纤维素粉”,唯有能利用纤维素的微生物方可在该培养基上生存。()（2）实验流程中“选择培养”的培养基是固体培养基。()（3）选择培养的目的是使纤维素分解菌增殖,含量增多。()2．纤维素由哪些元素组成？属于哪类糖？自然界中纤维素含量最高的天然产物是什么？列举商品纤维素。刚果红染色法②在此两类培养基中哪些作为碳源、氮源？探究分离不同土壤环境中分解纤维素的微生物的方法及其影响因素一.实验目的：（实验干什么?）分离分解纤维的微生物并分析影响因素二.实验变量分析：自变量：不同土壤环境中的侵出液因变量：分解纤维素的微生物无关变量：接种条件、培养温度、稀释度大小、培养基的量、恒温培养时间……..三.实验原理：分离微生物的原理：将土壤侵出液梯度稀释后，取一定量的稀释后的液体，采用稀释涂布平板法涂布在有刚果红试剂的鉴别培养基上，而得到呈透明圈的产生纤维素酶的菌落。(说明实验步骤的依据，自变量和因变量的影响）实验流程几个关键步骤为：1.先用选择培养基，再用鉴别培养基。选择培养基为液体培养基，以增加纤维素分解菌的浓度；鉴别培养基为固体培养基。2.对照实验的设置①判断某个培养基是否具有选择作用时，应设立基础培养基进行对照。本实验方案中应设置普通培养基(或牛肉膏蛋白胨培养基)作为对照实验。分离纤维分解菌先进行选择培养，经梯度稀释后，再涂布到鉴别培养基上。②判断所使用的培养基是否被杂菌污染时，应设立不接该菌种的培养基进行空白对照。区别：课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为唯一氮源的选择性培养基上，直接分离得到菌落。本课题通过选择培养，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在鉴别培养基上。其他步骤基本一致。1.阅读教材旁栏中的纤维素分解菌选择培养基的成分回答下列问题。(1)旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基?为什么?液体培养基,因为配方中无凝固剂。(2)这个培养基对微生物是否具有选择作用?如果有,是如何进行选择的?(3)怎样设计对照实验验证该培养基的选择作用?1.两种刚果红染色方法各有哪些优点与不足？3.如果向含有分解尿素的细菌培养基中加入酚红指示剂会出现类似的圈吗?五.实验结果：（预测实验结果：六.实验结论：回答以下两个问题。(1)分离纯化纤维素分解菌后,如何通过实验对其进一步确定为纤维素分解菌?(2)如何测定样品中有无纤维素酶?本课题知识小结1.鉴定纤维素分解菌时，可以使用刚果红对其染色，常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；另一种是倒平板时就加入刚果红。两种染色法的结果是A．均会出现透明圈B．均不会出现透明圈C．方法一出现，方法二不出现D．方法一不出现，方法二出现2.纤维素分解菌能够产生纤维素酶分解纤维素。回答下列问题：(1)在培养纤维素分解菌的过程中，进行平板划线时，每次划线结束后仍然要灼烧接种环，原因是________。(2)在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用________染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。甲同学在实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位于()A．③B．①②C．②③D．①②③(4)丙同学在提取和分离纤维素酶的过程中，为了抵制外界酸和碱对酶活性的影响，采取的措施是向提取液和分离液中添加________。若探究纤维素酶活性的最适温度，如何设置对照？____________________________。3.生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用作物废弃物(秸秆)生产乙醇，其技术流程为：纤维素酶解→酵母发酵→蒸馏→成品。纤维素酶的成本能否下降，是能否实现乙醇工业化生产的关键因素。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程。土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。结合所学知识回答下列问题。(1)最好选择怎样的环境采集土样？_________。(2)下面是一种培养基配方：纤维素粉5g、NaNO31g、Na2HPO4·7H2O1.2g、KH2PO40.9g、MgSO4·7H2O0.5g、KCl0.5g、酵母膏0.5g、水解酪素0.5g(蒸馏水定容到1000mL)。该培养基能够增加样品中纤维素分解菌的浓度，其原理是_______________________________________________。(3)为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入______染液，将筛选获得的菌液稀释后用______的方法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生______的菌落作为菌种进行扩大培养。(4)纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量如何呢？请设计实验进行检测。___________________________________